设门和补偿问题

结气期

老师您好，我最近做凋亡又遇到一个问题，FITC单染在FLOWJO补偿后（下图）出现了最右边一小部分细胞（红色圆圈内）。我想问一下是什么原因呢，
是因为设门的时候没有把粘连细胞排除吗？

niwanmao

不知道你做的样本类型以及通道对应的标记，无法明确原因。
一般如果不应该出现的群体，大多是非特异性染色。

结气期

niwanmao 发表于 2022-5-31 18:00
不知道你做的样本类型以及通道对应的标记，无法明确原因。
一般如果不应该出现的群体，大多是非特异性染色 ...

我做的是ptx药物处理A54924h后用Annexin-v-FITC和PI双染，上面第一个图是FITC单染，下面一张图是阳性诱导后的空白对照样本。

niwanmao

结气期 发表于 2022-6-1 09:17
我做的是ptx药物处理A54924h后用Annexin-v-FITC和PI双染，上面第一个图是FITC单染，下面一张图是阳性诱导 ...

Annexin V最高的这群圈中，反过去看其在FSC/SSC上的位置在哪里。

结气期

niwanmao 发表于 2022-6-1 13:30
Annexin V最高的这群圈中，反过去看其在FSC/SSC上的位置在哪里。

我把那一部分圈出来，单独看的。

niwanmao

结气期 发表于 2022-6-1 14:37
我把那一部分圈出来，单独看的。

FL3-FL1的补偿是多少？

结气期

niwanmao 发表于 2022-6-1 15:08
FL3-FL1的补偿是多少？

倪老师，我不知道我的补偿操作是否和主流一致，下面附上补偿图片。

结气期

结气期 发表于 2022-6-1 17:43
倪老师，我不知道我的补偿操作是否和主流一致，下面附上补偿图片。

样品管补偿图，药物浓度依次增加。

Fairy

不好意思，想问一个flowjo软件的问题，前面小方格是什么意思呢，为什么我的空白对照没有呢，如果按照这样做在空白上的十字区分应用不到其他组，请问有什么解决的方法吗

niwanmao

结气期 发表于 2022-6-1 17:43
倪老师，我不知道我的补偿操作是否和主流一致，下面附上补偿图片。

这个图看不出你的补偿值，你可以先从补偿上面确认一下高表达的这群，是不是Annexin V+PI+双阳性群因过度补偿下来的。