小鼠造血干细胞/祖细胞 (HSPC)的分析和分选

niwanmao

造血干细胞/祖细胞 (HSPC) 可以通过表面抗原标记的阳性或阴性来分离。一般来说，与人类造血干细胞相关的标志物是 CD34+ CD38-CD45RA-CD90/Thy1+ c-Kit low/- Lin-。 小鼠 HSPC 被认为是 CD34low/-c-Kit+ Sca-1+ CD90/Thy1low CD38+/- Lin-。

下图是分选小鼠和人HSPC所需标记的示意图，左侧为分选所需的阳性标记，右侧为阴性标记。  # 鼠 HSPCs 可以是 CD34+也可以是CD34-，CD34+为short-term HSC（SH-HSC），CD34-为Long-term HSC（LT-HSC）   ## 人HSPCs 是 c-Kit low/-


Lin指的是各种成熟细胞系列特异性标记的混合物（对于小鼠为CD3/CD4/CD8/CD41/B220/Gr-1/Ter119，对于人则为CD3/CD4/CD8/CD56/CD33/CD14/CD16/CD41），用于排除成熟细胞的干扰。最后分析或分选的设门图如下：



参考文献：Vadakke-Madathil S, Limaye LS, Kale VP, Chaudhry HW. Flow Cytometry and Cell Sorting Using Hematopoietic Progenitor Cells. Methods Mol Biol. 2019;2029:235-246. doi:10.1007/978-1-4939-9631-5_18

汀雅

老师，我想请问一下，你说Lin指的是各种成熟细胞系列特异性标记的混合物，这个混合抗体是我们自己混合还是有专门的试剂盒呢？

niwanmao

汀雅 发表于 2023-3-27 16:09
老师，我想请问一下，你说Lin指的是各种成熟细胞系列特异性标记的混合物，这个混合抗体是我们自己混合还是 ...

上面有写的，就是自己买同样荧光素的各个抗体，混在一起。

汀雅

niwanmao 发表于 2023-3-27 16:20
上面有写的，就是自己买同样荧光素的各个抗体，混在一起。

明白了，谢谢老师！

wwwhy

请问要是磁珠分小鼠骨髓造血干细胞，用生物素化抗体加nanobeads，是单独用ckit或者SLAM分就可以吗？

niwanmao

wwwhy 发表于 2023-9-8 08:59
请问要是磁珠分小鼠骨髓造血干细胞，用生物素化抗体加nanobeads，是单独用ckit或者SLAM分就可以吗？ ...

基本上问题不大，可能会混有一些祖细胞。

960416xp

老师，您好，我想请问一下，这个过程不需要染死活吗？

niwanmao

960416xp 发表于 2024-5-24 10:43
老师，您好，我想请问一下，这个过程不需要染死活吗？

最好染一下