CD107a作为T细胞活化标志

llllhhhhh

最近看文献里面用CD107a测T细胞活化的时候，CD107a抗体是在培养过程中就加入了的。但是用96孔板培养细胞，加多少抗体的量合适呢？我买的抗体是BIOLEGEND的，使用说明是5 µl per million cells or 5 µl per 100 µl of whole blood.

niwanmao

K562细胞调整至1×10E6/ml
PBMC调整至1×10E7/ml
两种细胞分别往96孔板各加入100ul，这样就形成了效靶比10:1，总体积200ul，此时，加入CD107a抗体10ul，孵育1小时后加入刺激剂。


另外，发帖请务必发到以下4个版块，不要放在分享版块：
1、基础问题（如仪器、原理、试剂耗材、软件等）
2、临床检测方面（如免疫分型、淋巴细胞亚群等）
3、科研方面（如周期、凋亡、线粒体、DC、巨噬等）
4、流式分选和磁珠分选
此次先帮你转移过去，下不为例哦。

llllhhhhh

niwanmao 发表于 2022-6-21 21:19
K562细胞调整至1×10E6/ml
PBMC调整至1×10E7/ml
两种细胞分别往96孔板各加入100ul，这样就形成了效靶比10 ...

好的，谢谢老师！

llllhhhhh

niwanmao 发表于 2022-6-21 21:19
K562细胞调整至1×10E6/ml
PBMC调整至1×10E7/ml
两种细胞分别往96孔板各加入100ul，这样就形成了效靶比10 ...

另外，请问倪老师：在这个实验中，做流式调电压和补偿的时候，可否用PBMC设置空白管和单染管呢？共培养的细胞可能不太够用

niwanmao

llllhhhhh 发表于 2022-6-23 09:44
另外，请问倪老师：在这个实验中，做流式调电压和补偿的时候，可否用PBMC设置空白管和单染管呢？共培养的 ...

只要标本中存在对应标记的阳性细胞和阴性细胞，均可用于调节补偿。