流式周期问题

JC小火山

老师想问几个流式周期问题1.细胞固定是应该怎么固定呢，目前看到了好多说法，是将PBS重悬后的细胞加入预冷的无水乙醇使终浓度是75%，还是将无水乙醇加入PBS重悬后的细胞，还是直接在细胞沉淀里加75%的预冷无水乙醇；是-20固定还是4度固定，固定多久比较好。

2.最后流式结果里的CV值和什么因素有关呢，是大于10就结果不能用了吗。
真诚的希望老师能答疑解惑

结气期

1，我一般是用pbs重悬细胞后，离心去pbs。然后用预冷的75%的无水乙醇重悬细胞，然后在4摄氏度下固定2h。
2，第二个我也不太懂，我这里默认大于10的不用

JC小火山

结气期 发表于 2022-6-29 16:27
1，我一般是用pbs重悬细胞后，离心去pbs。然后用预冷的75%的无水乙醇重悬细胞，然后在4摄氏度下固定2h。
2 ...

可是我有看到很多说直接加75%的无水乙醇会导致细胞团聚现象，很难重悬成单细胞

niwanmao

JC小火山 发表于 2022-6-29 18:24
可是我有看到很多说直接加75%的无水乙醇会导致细胞团聚现象，很难重悬成单细胞 ...

75％乙醇不叫无水乙醇。
边震荡细胞边滴75％乙醇即可。