PI区分细胞死活

苏沁沁 · 发表于 2022-6-29 18:05:43

倪老师您好，这是肝癌组织标本研磨后未破膜，用PI染色后直接上机的图，想分选出死细胞和活细胞，但是出的峰图有不理解的地方，请教一下。

niwanmao · 发表于 2022-6-29 19:44:14

上机前，你有没有在镜下观察过细胞？从图形上看细胞应该都碎了。

scaleus · 发表于 2022-6-29 21:52:27

你这里基本没有活细胞啊，所谓PI阴性的部分也都是染不上的碎片。我们做分析都是消化的，分选就更不能研磨了

苏沁沁 · 发表于 2022-6-30 08:33:58

niwanmao 发表于 2022-6-29 19:44
上机前，你有没有在镜下观察过细胞？从图形上看细胞应该都碎了。

实验员说上机前染过台盼蓝，强调有活细胞，可我上机时只是看第一张图就觉得不对劲，这么多种峰，不确定每个代表什么意思

苏沁沁 · 发表于 2022-6-30 08:34:17

scaleus 发表于 2022-6-29 21:52
你这里基本没有活细胞啊，所谓PI阴性的部分也都是染不上的碎片。我们做分析都是消化的，分选就更不能研磨了 ...

您是哪种组织？

苏沁沁 · 发表于 2022-6-30 09:30:12

niwanmao 发表于 2022-6-29 19:44
上机前，你有没有在镜下观察过细胞？从图形上看细胞应该都碎了。

而且如果随之时间增加，PI染料也会慢慢渗透进细胞内，那是不是这种染色方法就不适合用于分选死活细胞，比如2、30分钟

tiger · 发表于 2022-6-30 09:48:23

苏沁沁发表于 2022-6-30 09:30
而且如果随之时间增加，PI染料也会慢慢渗透进细胞内，那是不是这种染色方法就不适合用于分选死活细胞，比 ...

PI浓度是多少？

苏沁沁 · 发表于 2022-6-30 09:55:42

tiger 发表于 2022-6-30 09:48
PI浓度是多少？

使用图片中浓度，5ug/ml

tiger · 发表于 2022-6-30 09:59:56

苏沁沁发表于 2022-6-30 09:55
使用图片中浓度，5ug/ml

区分死活，1ug/ml足够，加多了反而不好

苏沁沁 · 发表于 2022-6-30 10:02:42

tiger 发表于 2022-6-30 09:59
区分死活，1ug/ml足够，加多了反而不好

会随着多久时间，PI也渗透进胞内呢？这么多个峰代表什么意思呢？

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[凋亡检测] PI区分细胞死活