小鼠巨噬细胞标记

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小鼠巨噬细胞M1、M2如何用最少的抗体来标记出来

niwanmao

参见：
巨噬细胞M1、M2分型的标记选择
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-9709-1-1.html
(出处: 流式中文网)




另外，发帖请务必发到以下4个版块，不要放在分享版块：
1、基础问题（如仪器、原理、试剂耗材、软件等）
2、临床检测方面（如免疫分型、淋巴细胞亚群等）
3、科研方面（如周期、凋亡、线粒体、DC、巨噬等）
4、流式分选和磁珠分选
此次先帮你转移过去，下不为例哦。

Claire-pei

可以做个滴定，找到最合适的抗体染色浓度

2021121361

想请问大家制备细胞样本的时候，我一般控制在10^6每管，但是离心完后根本看不到细胞沉淀，导致我弃上清的时候可能吧细胞沉淀弃掉了，第一次上机细胞都没有，有没有什么好的办法呢

niwanmao

2021121361 发表于 2022-7-22 07:53
想请问大家制备细胞样本的时候，我一般控制在10^6每管，但是离心完后根本看不到细胞沉淀，导致我弃上清的时 ...

离心的速度和时间可能不足。去上清的时候，轻轻吸去，并且尽量离沉淀远一点。

2021121361

niwanmao 发表于 2022-7-22 12:06
离心的速度和时间可能不足。去上清的时候，轻轻吸去，并且尽量离沉淀远一点。 ...

请问老师我500g 5min的离心条件 应该是足够的吧

niwanmao

2021121361 发表于 2022-7-25 15:41
请问老师我500g 5min的离心条件 应该是足够的吧

看细胞类型，有些细胞偏小，可能需要加大一点离心力或延长时间。

2021121361

请问大家有没有用raw264.7这个细胞做免疫分型的，F4/80应该是全巨噬细胞标记没错吧。今天送的样F4/80没有染上，很诡异。

niwanmao

2021121361 发表于 2022-7-25 23:52
请问大家有没有用raw264.7这个细胞做免疫分型的，F4/80应该是全巨噬细胞标记没错吧。今天送的样F4/80没有染 ...

有些细胞株在传代或培养过程中，典型标记会丢失的。或者发生了细胞株之间的污染。

2021121361

请问如果染色后当天不能上机，正确的顺序应该是染完表面抗原，固定，放4度，第二天再破膜染胞内是不是呢？