zj8237277 发表于 2017-5-25 22:46 同型对照消除自发荧光???没听说啊 非特异性抗体结合包括由于Fc非特异性结合+抗体浓度过高的非特异性结合,同型对照和Fc阻断的意义是一样的,所以在平时实际操作中,还是建议大家Fc阻断+抗体滴定一起结合。 |
以前做同型对照,总感觉效果不好,能不用就尽量不用了,也没有加阻断剂,感觉还行。 |
ps654321 发表于 2017-5-22 21:28 有个请教,单一细胞株,比如要验证CD20+,利用Fc, 设组: 1、空白细胞+Fc阻断剂(这里阻断剂能否去掉?) 阻断剂不能去掉。 为何不可以去掉呢? 空白细胞上又没染染料,上流式也不会发光,加阻断剂也不是为了阻止自发荧光? 为何还要多加阻断剂呢? |
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niwanmao 发表于 2017-5-23 10:59 倪老师,您好!我最近在做foxp3分子染色,之前搜索站内您的帖子看您说foxp3需要做同型对照,但是按照我做的foxp3的同型对照分析使得我本身的foxp3分群变成了假阳性,看到您这篇说同型对照过时了,那么我做foxp3分子还需要做同形对照吗? |
zhangyy 发表于 2017-10-14 10:21 可以用Fc Blocking+FMO对照。 |
niwanmao 发表于 2017-11-7 10:49 谢谢您!我昨天看到了您的微信推送,学习了很多,但距离自己应用还需要自己多学多看多悟。 |
请教下,如果是做小鼠细胞的流式分析,实验室用到fc阻断剂时会应用2%胎牛血清的PBS,请问下FBS并不在倪老师的阻断剂中,这个是否正确,以及阻断多长时间。 |
854133308 发表于 2018-11-13 10:55 用到的buffer是2%FBS的PBS,那这个有阻断作用吗 |
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