再谈同型对照：是该放弃这过时的东西了

niwanmao

zj8237277 发表于 2017-5-25 22:46
同型对照可以消除自发荧光，FC受体介导的抗体结合，非特异性抗体结合。。。而Fc阻断只是消除了FC受体介导的 ...

同型对照消除自发荧光？？？没听说啊

非特异性抗体结合包括由于Fc非特异性结合＋抗体浓度过高的非特异性结合，同型对照和Fc阻断的意义是一样的，所以在平时实际操作中，还是建议大家Fc阻断＋抗体滴定一起结合。

guchen2016

以前做同型对照，总感觉效果不好，能不用就尽量不用了，也没有加阻断剂，感觉还行。

zj8237277

ps654321 发表于 2017-5-22 21:28
有个请教，单一细胞株，比如要验证CD20+，利用Fc，
设组：
1、空白细胞+Fc阻断剂（这里阻断剂能否去掉？）

阻断剂不能去掉。

为何不可以去掉呢？ 空白细胞上又没染染料，上流式也不会发光，加阻断剂也不是为了阻止自发荧光？ 为何还要多加阻断剂呢？

lgfffancy

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zhangyy

niwanmao 发表于 2017-5-23 10:59
请仔细看帖，同型对照是祖传的观念，并且可以说90％以上的同型对照都是没选对的，因为谁都没有验证过非特 ...

倪老师，您好！我最近在做foxp3分子染色，之前搜索站内您的帖子看您说foxp3需要做同型对照，但是按照我做的foxp3的同型对照分析使得我本身的foxp3分群变成了假阳性，看到您这篇说同型对照过时了，那么我做foxp3分子还需要做同形对照吗？

niwanmao

zhangyy 发表于 2017-10-14 10:21
倪老师，您好！我最近在做foxp3分子染色，之前搜索站内您的帖子看您说foxp3需要做同型对照，但是按照我做 ...

可以用Fc Blocking＋FMO对照。

zhangyy

niwanmao 发表于 2017-11-7 10:49
可以用Fc Blocking＋FMO对照。

谢谢您！我昨天看到了您的微信推送，学习了很多，但距离自己应用还需要自己多学多看多悟。

854133308

请教下，如果是做小鼠细胞的流式分析，实验室用到fc阻断剂时会应用2%胎牛血清的PBS，请问下FBS并不在倪老师的阻断剂中，这个是否正确，以及阻断多长时间。

854133308

854133308 发表于 2018-11-13 10:55
请教下，如果是做小鼠细胞的流式分析，实验室用到fc阻断剂时会应用2%胎牛血清的PBS，请问下FBS并不在倪老师 ...

用到的buffer是2%FBS的PBS，那这个有阻断作用吗