多聚甲醛固定细胞后怎么保存时间长

huanghyes · 发表于 2011-10-11 18:35:58

多聚甲醛固定好细胞后，需要等其他批次样本一起做，能保存多久，怎么保存？谢谢

niwanmao · 发表于 2011-10-11 18:35:59

你是要测表面标记还是胞内标记？从查阅的文献来看，应该保存4周问题不大。

huanghyes · 发表于 2011-10-13 20:37:11

谢谢，我测组蛋白的磷酸化水平，是胞内标记吧

niwanmao · 发表于 2011-10-13 21:45:50

huanghyes 发表于 2011-10-13 20:37

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谢谢，我测组蛋白的磷酸化水平，是胞内标记吧

组蛋白应该是核内的。

sfqiang23 · 发表于 2011-11-2 22:35:48

测表面标记抗原的话能保存多长时间啊？
多聚甲醛怎样加？是在抗体孵育后加多聚甲醛孵育10分钟，离心洗涤后再加pbs放冰箱保存？还是加多聚甲醛后放冰箱保存

niwanmao · 发表于 2011-11-2 22:46:57

sfqiang23 发表于 2011-11-2 22:35

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测表面标记抗原的话能保存多长时间啊？
多聚甲醛怎样加？是在抗体孵育后加多聚甲醛孵育10分钟，离心洗涤后 ...

从站友的测试结果看：http://www.flowcyto.cn/bbs/forum ... =1759&fromuid=1，应该看标记而定。
所以我建议你最好先做过比较，如果比较后发现：
1、多聚甲醛固定之后对抗原结合没影响，就可以先加多聚甲醛，放冰箱里保存。具体时间确实没人做过，按照我们平时的经验，我估计4－7天应该可以。
2、如果多聚甲醛对抗原结合有影响，则应该先加抗体孵育，后加多聚甲醛固定，这个时候，由于抗体的荧光会衰减，所以最好不要超过24小时。

sfqiang23 · 发表于 2011-11-9 23:51:05

1%的多聚甲醛配制完后在2-4度冰箱中保存多长时间不会有问题啊？有的建议是现用现配。有的说可以保存7天，有的说可以保存3个月，不知究竟多长时间？

niwanmao · 发表于 2011-11-10 08:54:33

sfqiang23 发表于 2011-11-9 23:51

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1%的多聚甲醛配制完后在2-4度冰箱中保存多长时间不会有问题啊？有的建议是现用现配。有的说可以保存7天，有 ...

帮你找了点资料，他们是4％多聚甲醛，保存在玻璃器皿中，4℃不超过7天。看看对你是否有参考意义：http://www.histosearch.com/histo ... raformaldehyde.html

huanghyes · 发表于 2011-11-11 10:30:51

不胜感激

一成天 · 发表于 2011-11-11 15:27:28

niwanmao 发表于 2011-11-2 22:46

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从站友的测试结果看：http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=redirect&goto=findpost&ptid=859&pid=1 ...

感谢倪老师啊，我又掌握了个知识点哈哈

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