关于PI和syto9染料的应用

aivy

用PI和syto9两种染料做细菌的死活比例，设置了三个浓度梯度的药剂处理（分别为高、中、低），处理时间12h，为什么流式的结果出不来梯度呢？而且用蒸馏水做的对照，反而死菌数比药剂处理的高。另外想问下为什么有时候死菌和活菌数的比例都不高呢？

niwanmao

这个结果不是挺好的。
至于蒸馏水也能测出这么多活菌和死菌，需要排除一下管路是不是被前面的标本污染的缘故。
而药物浓度增高，梯度不明显，你能够确定这个药物随着浓度增高对这种细菌肯定能够产生梯度吗？

50％活菌和50％死菌

aivy

niwanmao 发表于 2012-12-19 13:40

                               
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这个结果不是挺好的。
至于蒸馏水也能测出这么多活菌和死菌，需要排除一下管路是不是被前面的标本污染的缘 ...

嗯，之前在平板上做的时候是有梯度的，这个比较好的结果是异丙醇做出来的，不是药剂，药剂处理的就没这么明显。

aivy

niwanmao 发表于 2012-12-19 13:40

                               
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这个结果不是挺好的。
至于蒸馏水也能测出这么多活菌和死菌，需要排除一下管路是不是被前面的标本污染的缘 ...

老师您好，我想问下染料的比例会不会对结果有影响?例如，用异丙醇处理的细菌，染料比例1：6比较合适，这个比例会不会不适用于药剂处理的细菌？

niwanmao

aivy 发表于 2012-12-24 10:58

                               
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老师您好，我想问下染料的比例会不会对结果有影响?例如，用异丙醇处理的细菌，染料比例1：6比较合适，这 ...

这个应该不会吧。

骑猪上高速

niwanmao 发表于 2012-12-19 13:40
这个结果不是挺好的。
至于蒸馏水也能测出这么多活菌和死菌，需要排除一下管路是不是被前面的标本污染的缘 ...

倪老师，请问您是如何看出哪一团是dead的？死细胞可以被SYTO和PI同时染色，而活细胞只有SYTO，这张图这两群看起来好像都是双阳性的。

niwanmao

骑猪上高速 发表于 2020-11-5 21:18
倪老师，请问您是如何看出哪一团是dead的？死细胞可以被SYTO和PI同时染色，而活细胞只有SYTO，这张图这两 ...

这不是双阳性，而是单阳的两群，只是因为细菌的分布和常见细胞不同，呈斜向