利用application settings实现不同仪器、实验的流式结果标准化

niwanmao

有些流式细胞术实验可能对荧光强度的数值没有非常精确的要求，但有些实验就需要不同的时间、不同的机器之间能实现标准化对比。为此，BD Biosciences在2012年3月份出了一份技术文档，利用 FACSDiva V6的“Application Settings”以实现在不同机器、不同时间实验之间的数值标准化。
注：不知道coulter的各个机型之间是否有类似方案可以实施？至于其它公司，我个人觉得流式细胞仪型号少，可能需求不是很大。
这个protocol主要的步骤：
1、运行Cytometer Setup and Tracking (CS&T) 软件，用 CS&T beads做初始的质控。
2、用细胞或目的颗粒微调：用阴性细胞确定最小PMT电压，确定标准是计算阴性细胞rSD大约为质控中rSD_EN（electronic noise robust standard deviation）（见图1）的2.5倍左右。用强阳性细胞确定合适的PMT电压，必须使高表达的细胞荧光强度在质控报告linearity max channel数值（见图1）以内，最好离max值稍远一点，以确保以后实际检测时一些极端高表达的数据也能显示出来。

CS&T质控报告

图1. CS&T质控报告
3、保存application settings。在Browser窗口中打开experiment，在其中的cytometer settings点击右键，save或export均可。要应用application settings，就点击apply就可以了。
＝＝＝＝质控指标科普链接＝＝＝＝
BD流式细胞仪 - 检测性能评测(Qr, Br)
流式细胞仪的灵敏度和分辨率视频讲解

＝＝＝＝详细步骤请参见下面的技术手册（英文）＝＝＝＝＝
BD_FACSDiva_Stndrd_App_Setup_TechBulletin.pdf (492.02 KB, 下载次数: 26)

2013-5-22 11:40 上传

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FACSDiva标准化流程

dragonhzqsmmu

Diva软件的这个功能据说是很厉害，之前在卓越中心接受培训的时候他们提过这个setting同步的方法可以保证不同地点不同时间的两台流式细胞仪，一台重复另一台的结果的重现性极佳，基本上不会出现重复出来的情况
当时没细问这个软件是否只适用于BD的指定机型，还是BD的全部机器？另外要实现这个功能好像需要联网，但这样有点小担心，会不会导致机器感染病毒出现问题？

niwanmao

dragonhzqsmmu 发表于 2013-6-15 20:59

                               
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Diva软件的这个功能据说是很厉害，之前在卓越中心接受培训的时候他们提过这个setting同步的方法可以保证不 ...

应该是只适用于BD的机器，但calibur肯定不包括
实现这个功能需要联网吗？不需要吧，application setting是可以导出和导入的。

dragonhzqsmmu

niwanmao 发表于 2013-6-15 21:05

                               
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应该是只适用于BD的机器，但calibur肯定不包括
实现这个功能需要联网吗？不需要吧，application settin ...

那我们只能口水了

上次听说过这个功能好像能自动实时调整设备设置的，这个应该需要联网的吧？

niwanmao

dragonhzqsmmu 发表于 2013-6-15 21:38

                               
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那我们只能口水了

上次听说过这个功能好像能自动实时调整设备设置的，这个应该需要联网的吧？ ...

自动实时？应该是指用质控微球自动调节的意思吧。不会联网的。