JC-1检测膜电位结果如何分析？

'I'

想请教一下大家，流式测膜电位结果该怎么分析，资料说计算红绿荧光强度比值，但那是怎么得出来的  我拷回来的结果只有各个象限的百分率，非常感谢~！

niwanmao

不知道你这个图是正常标本还是阳性对照？

一般JC-1的分析不是分析两者比例的，而是如下图我画的这样分析：

JC-1分析示意图

mybiosciences

倪老师，是看这两群细胞的荧光强度吗？

niwanmao

mybiosciences 发表于 2013-6-4 19:31

                               
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倪老师，是看这两群细胞的荧光强度吗？

不是的，就是圈右下那堆细胞，然后看其比例的变化。
例如随着药物浓度增高，右下那堆细胞逐渐增加，那么提示药物可能是通过线粒体膜电位降低来诱导凋亡的。

'I'

niwanmao 发表于 2013-6-4 16:32

                               
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不知道你这个图是正常标本还是阳性对照？

一般JC-1的分析不是分析两者比例的，而是如下图我画的这样分析： ...

这是加了药物的   那就是说直接看右下象限的百分率的多少来判断  线粒体膜电位降低的细胞的多少是吧？  可以直接用百分率来表示 然后进行统计分析？

niwanmao

'I' 发表于 2013-6-4 20:07

                               
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这是加了药物的   那就是说直接看右下象限的百分率的多少来判断  线粒体膜电位降低的细胞的多少是吧？  可 ...

是的，就用百分比表示线粒体膜电位降低的细胞比例，但是建议用直接设门的方法圈中那群细胞，因为用十字门有时候不一定可以正确地圈中。

'I'

niwanmao 发表于 2013-6-4 20:49

                               
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是的，就用百分比表示线粒体膜电位降低的细胞比例，但是建议用直接设门的方法圈中那群细胞，因为用十字门 ...

好的   我还想问一下倪老师   那什么情况下是用红绿荧光强度比值来表示膜电位的改变呢？ 因为看到很多文章里是用这种方式表示的，而且也是做的流式    还是用荧光显微镜或共聚焦显微镜检测的时候才用比值来表示？ 谢谢老师！

dragonhzqsmmu

http://www.cyto.purdue.edu/archi ... ossar1/cossariz.htm

我在网上搜索到普渡大学的相关参考，应该会有所帮助，最老的那篇原始文献发表在BBRC上面，因为比较早我这边没有找到PDF文档看看

另外这个JC-1试剂盒大家主要是从哪家公司购买的？我看sigma有单独的粉制剂也有kit出售

dragonhzqsmmu

sigma 5mg的包装，我看到的折扣价格是4千4百多，http://www.sigmaaldrich.com/cata ... ng=zh&region=CN

life有http://zh.invitrogen.com/site/cn ... otential-Probe.html
一个kit要6千多，5mg的要5596

dragonhzqsmmu

附上两篇参考文献供大家学习，第一篇提到用JC-1和TOTO3作为细胞凋亡的评估，这个能代替Anneix V/PI？