C57小鼠脾细胞流式细胞仪下未区分出单核细胞，求解

seasonwind · 发表于 2013-6-8 16:28:51

参考文献中的方法，取C57小鼠得到脾细胞悬液，裂解红细胞后，流式细胞仪下根本分不出单核细胞所在团块（见下图），流式的老师说可能是红细胞裂解的不好，买的是碧云天的ACK，严格按照说明书重做了一次，结果同前。还请各位前辈指点。

自己的结果

niwanmao · 发表于 2013-6-8 16:28:52

seasonwind 发表于 2013-6-9 10:50

登录/注册后可看大图

老师，原始文件我拿到了，扩展名不符合论坛要求，怎么上传呢？先截图了贴在这里吧。。

1、可以将数据压缩成压缩包.ZIP或.RAR再上传。
2、关于你的结果，我认为由于实体组织在剪碎、消化、过滤后，常常会产生大量的死细胞和碎片，故建议务必加上死细胞染料，排除死细胞。否则象下图虽然能够圈中部分单核细胞，但比例太低了。

单核细胞位置

＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝
给您推荐一篇文章《新的基于Ly6C/Ly6G设门方法分析小鼠脾脏粒、单核细胞/巨噬细胞》，建议参考这篇文章中的设门方法（如下图）：

参考设门方案

使用流式中文网资料阅读器在线阅读，免流星，内容与附件完全一样，且支持划词翻译（使用帮助）

（如图片无法正常显示请复制链接：http://www.flowcyto.cn/bbs/reade ... cydN6pZG6JdaSUUJVZc）
◢如确实需要下载附件，请见：

mouse_splenic_myeloid.pdf (726.82 KB, 下载次数: 62) ，下载需要注册会员权限（为什么？）
PDF文件：

niwanmao · 发表于 2013-6-8 16:46:29

光靠FSC-SSC有时候不一定能说明问题，为什么不加一个单核细胞标记呢？CD14之类的。

seasonwind · 发表于 2013-6-8 21:49:00

niwanmao 发表于 2013-6-8 16:46

登录/注册后可看大图

光靠FSC-SSC有时候不一定能说明问题，为什么不加一个单核细胞标记呢？CD14之类的。 ...

谢谢您，我用cd11b标记的，有图，可是该怎么上传呢？回复主题怎么不可以传照片。

niwanmao · 发表于 2013-6-8 22:31:15

seasonwind 发表于 2013-6-8 21:49

登录/注册后可看大图

谢谢您，我用cd11b标记的，有图，可是该怎么上传呢？回复主题怎么不可以传照片。 ...

点击回复跳出的是快速回复框，再单击右上方"高级模式"，就可以上传图片和附件了。建议上传原始数据，这样方便我们查看反设门的位置

seasonwind · 发表于 2013-6-8 23:07:10

niwanmao 发表于 2013-6-8 22:31

登录/注册后可看大图

点击回复跳出的是快速回复框，再单击右上方"高级模式"，就可以上传图片和附件了。建议上传原始数据，这样 ...

非常感谢您原始数据好的明天跟管理员刻碟去因为不让考U盘每次都是拍照看的

seasonwind · 发表于 2013-6-9 10:50:06

niwanmao 发表于 2013-6-8 22:31

登录/注册后可看大图

点击回复跳出的是快速回复框，再单击右上方"高级模式"，就可以上传图片和附件了。建议上传原始数据，这样 ...

老师，原始文件我拿到了，扩展名不符合论坛要求，怎么上传呢？先截图了贴在这里吧。。

FSC-SSC

CD11b-Ly6C

账号		自动登录	找回密码
密码			加入流式中文网

[其它] C57小鼠脾细胞流式细胞仪下未区分出单核细胞，求解