死活菌计数结果不稳定，如何优化

wsnxbdr

我是用96孔板进样，做纯种细菌的死活菌计数。一个孔有250μL的样品，每次进样20μL。进样前是用仪器振荡10s的方式混匀。
但如果连续检测同个孔，发现几次结果的差别还是挺大的。首先，细菌的总数最大与最小的差20%，每次的活菌比例也不一样，总数高的，活菌比例也大一些。5次检测活菌比例最大为77%，最小是71%，差了6%。
请问有没有好的办法减轻这种不稳定的结果。是不是振荡的方式效果不好，我们的仪器还有进样针反复吸入再吐出的混匀方式，我并没有试，因为担心会影响样品。
如果不能避免这种不稳定的话，取平均值或几次累加的方法可行吗？一个样测的次数太多，后面的样间隔时间太长，应该不太好吧。

niwanmao

我觉得，首先确保标本质量没问题，标本肯定一致的话，再去排除仪器系统误差。
不知道是什么仪器？会不会问仪器的技术支持更好一点？

didi_zhou

能先说说是什么仪器么？另外我觉得使用抽吸混匀的话比振荡会好很多。

mybiosciences

差异好像不大啊