流式细胞术胞内信号转导检测实例，美图欣赏：）

didi_zhou

看很多用户都有考虑或者讨论过使用流式来做细胞信号通路的，其实在我做研究生的时候也深有体会，如果流式吧WB完全取代就好了。所有实验都可以在3个小时内完成，就不用搞一整天或两天那么麻烦了。特别是磷酸化，很难重复，做完又要去做灰度扫描什么的。

当时由于直标抗体的限制，以及试剂的影响所以很难做到。不过经过这几年的发展，各个公司都推出了相应的商品化试剂及各种指标抗体，这个问题也算解决了。

下面介绍的这个实验是用LPS刺激人血后观察其SAP-JNK、pERK、p-p38在1、2、4、6、10、15、20、30、40、50及60分钟后的变化情况，使用Kaluza软件的雷达图同分析很好玩大家一起讨论讨论。

仪器：Gallios
染料：CD14-PC7、SAP-JNK-PE、pERK-Alexa 647、p-p38-Alexa 488
破膜固定剂：PerFix-EXPOSE（可实现胞外、胞内、磷酸化一起染）
分析软件：Kaluza 1.2

图中蓝色散点表示Control，红色表示实验组。雷达图分个轴，靠近原点表示阴性，远离表示阳性；两轴之间远离原点表示共阳；靠近一个轴远离原点表示单阳。

下面是1 min的结果（更多结果内容请看PDF附件）：

didi_zhou

2-min （更多散点图及设门请查看附件PDF）：

didi_zhou

4-min （更多散点图及设门请查看附件PDF）：

didi_zhou

6-min （更多散点图及设门请查看附件PDF）：

didi_zhou

10-min （更多散点图及设门请查看附件PDF）：

didi_zhou

15-min （更多散点图及设门请查看附件PDF）：

boiledtea

楼主是用什么软件做的图？FlowJo么？怎么没见过这种设门方式？貌似很新鲜的样子。。。

didi_zhou

20-min （更多散点图及设门请查看附件PDF）：

didi_zhou

30-min （更多散点图及设门请查看附件PDF）：

didi_zhou

40-min （更多散点图及设门请查看附件PDF）：