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背景:目前尚无廉价而准确的评估患者心血管健康状况的血液检测。本研究将新型多色流式细胞术与流式细胞术指纹(cytometric fingerprinting (CF))结合起来,以准确分析循环干祖细胞(CPCs,参与促血管生成和血管修复)和微颗粒(MPs,常常参与炎症反应和栓塞病理机制)。CF可从CPCs和MPs的表达中发现患者独特的模式,从而生成该患者特有的血管健康指标(VHP)。
方法:CPCs和MPs分别采用相关的免疫标记,同时检测Ⅱ型糖尿病和年龄类似的健康供者,并利用CF进行分析。
CPC抗体组合:FITC-CD31 (BD Cat# 555445, Clone WM59), PE-Cy7-CD34 (BD Cat#348791, Clone 8G12), Percp-Cy5.5-CD3 (BD Cat# 340949, Clone SK7), Percp-Cy5.5-CD33 (BD Cat# 341650, Clone P67.6), Percp-Cy5.5-CD19 (BD Cat# 340951, Clone SJ25C1), V450-CD45 (BD Cat#560367 Clone HI30), PE-CD133 (Miltenyl Biotec Cat# 130-080-801, Clone AC133),APC-VEGFR2 (R&D Cat# FAB357A, Clone 89106)
MP抗体组合:FITC-Annexin-V (BD Bioscience Cat# 556570), PE-CD144 (BD Bioscience Cat# 560410, clone 55-7H1), Percp-Cy5.5-CD64 (BD Bioscience Cat# 561194, Clone 10.1), AF647-CD105 (BD Bioscience Cat# 561439, clone 266), APC-H7-CD41a (BD Bioscience Cat# 561422, clone HIP8), PE-Cy7-CD31 (Biolegend Cat#303118, clone WM59), BV421-CD3 (Biolegend Cat# 300433, Clone UCHT1).
结果:糖尿病患者的循环造血干祖细胞(CHSPCAng)量明显低于健康供者。在微颗粒检测上,除了CD31 bright/CD41 abright这群MP糖尿病患者偏低,其它7群微颗粒(CD3+ T-Lymphocyte MPs, CD105+ Endothelial MP, Annexin V+MPs , CD31+ MPs, CD41a+ ,Annexin V+/CD31+/CD41a+, CD31dim/CD41adim)的水平均是糖尿病患者偏高。这些指标结合起来,可能对药物研发、临床风险评估、诊断等起着一定作用。
糖尿病患者和健康供者的CP区别
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