求PI-Annexin V检测，如何染色才能染好？

pushiming77 · 发表于 2013-8-2 15:16:05

我的朋友做了PI-Annexin V的凋亡。出现了一些很让人费解的图。
他们染色是1个小时，PI和Annexin V一起加入，水浴避光共孵化一个时。

看他们的图上是不是Annexin V的染色染的不好，还是我流式操作的问题。
求高手指点一二。谢谢

didi_zhou · 发表于 2013-8-2 15:34:53

一个小时可能时间长了一点，一般室温15分钟就好了。单染的时候看起来效果还可以。另外一般PI单阳不会有那么多的比例才对，需要看看你的FS/SS怎么圈门的，最好能提供原始文件。理论上来说PI单阳的是没有膜结构的细胞核，或DNA碎片。从双染图来看流式操作问题不是很大，可能就是药物刺激的结果就是坏死不是凋亡，最好用阳性药做个对照，比如顺铂什么的。