为什么检测细胞增殖的时候很多protocol中染完Brdu还要再染PI？

judy006 · 发表于 2013-10-16 14:38:22

本帖最后由 judy006 于 2013-10-16 14:42 编辑

在测细胞增殖的时候，一般用Brdu或CFSE，但在看protocol的时候，发现很多染好Brdu后再染PI或7-AAD.PI或7-AAD一般是用来测周期的，那么在测增殖的时候为什么要染呢？难道是为了同时做增殖和周期？

niwanmao · 发表于 2013-10-16 15:37:42

我觉得有两个原因：
1、是想看哪个周期增殖为主。
2、想排除死细胞，避免非特异性染色。

如果你做得粗，不加PI也可以。

didi_zhou · 发表于 2013-10-17 00:00:28

BRDU看增殖，PI看周期，不冲突。

sally_no10 · 发表于 2013-10-22 12:00:01

加PI是看DNA含量的.判断一下周期.not一下死细胞.

椴树 · 发表于 2014-9-29 11:41:57

niwanmao 发表于 2013-10-16 15:37
我觉得有两个原因：
1、是想看哪个周期增殖为主。
2、想排除死细胞，避免非特异性染色。

老师请问染Brdu之前，不是要DNase处理细胞么？那么对PI没影响么？而且同时染PI的话，为什么不用A和W去除双联体呢？如果横坐标是PI纵坐标是counts的话，峰型图也不是单染PI那样的2个峰一个平台啊？

niwanmao · 发表于 2014-9-29 17:07:16

椴树发表于 2014-9-29 11:41
老师请问染Brdu之前，不是要DNase处理细胞么？那么对PI没影响么？而且同时染PI的话，为什么不用A和W去除 ...

椴树 · 发表于 2014-9-29 17:10:42

niwanmao 发表于 2014-9-29 17:07
不是啊，是RNase吧
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-217-1-1.html
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread ...

是DNase，为了暴露Brdu。还有一点BD的kit（NO.559619）上说7AAD需要和FITC调节补偿，但是7AAD用callibur里FL3，FITC用FL1，FL1和FL3不是没法调节补偿么？

niwanmao · 发表于 2014-9-29 17:12:49

椴树发表于 2014-9-29 17:10
是DNase，为了暴露Brdu。还有一点BD的kit（NO.559619）上说7AAD需要和FITC调节补偿，但是7AAD用callibur ...

你哪里看到的PROTOCOL？

椴树 · 发表于 2014-9-29 17:21:28

本帖最后由椴树于 2014-9-29 17:53 编辑

niwanmao 发表于 2014-9-29 17:12
你哪里看到的PROTOCOL？

椴树 · 发表于 2014-9-29 17:54:19

niwanmao 发表于 2014-9-29 17:12
你哪里看到的PROTOCOL？

老师传啦，第32页说了调节补偿

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