关于内皮细胞的检测

爽籁清风 · 发表于 2013-11-1 21:44:33

我想检测外周血内皮细胞，选的CD31 作为表面标记，但是结果显示CD31 阳性率高达80%，是不是血小板粘附引起的？还有别的原因吗？要是血小板粘附怎样能够排除？

dragonhzqsmmu · 发表于 2013-11-1 21:54:12

CD31应该不是内皮细胞特异性的marker

Biolegend公司有关CD31的描述也表明：

CD31 is a 130-140 kD glycoprotein, also known as platelet endothelial cell adhesion molecule (PECAM-1) and EndoCAM. It is a member of the Ig superfamily, expressed on endothelial cells, platelets, granulocytes, monocytes/macrophages, dendritic cells, and T and B cell subsets, and is critical for cell-cell interactions. The primary ligands for CD31 have been reported to be CD38 and the vitronectin receptor (αv β3 integrin, CD51/CD61). Other reported functions of CD31 are neutrophil emigration to sites of inflammation and angiogenesis.

niwanmao · 发表于 2013-11-1 22:13:40

可以参考一下这篇帖子：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2872-1-1.html
用EDTA抗凝，另外，我觉得可以加上CD41这种血小板特异性抗原来设门排除掉血小板。

爽籁清风 · 发表于 2013-11-4 15:37:17

niwanmao 发表于 2013-11-1 22:13

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可以参考一下这篇帖子：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2872-1-1.html
用EDTA抗凝，另外，我觉得可以加 ...

谢谢倪老师，我加了lin这个抗体，可是CD31阳性率还是很高，EDTA抗凝的浓度是多啊？

爽籁清风 · 发表于 2013-11-4 15:44:01

爽籁清风发表于 2013-11-4 15:37

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谢谢倪老师，我加了lin这个抗体，可是CD31阳性率还是很高，EDTA抗凝的浓度是多啊？ ...

还有个问题，我可不可以把我的四种抗体混到一起然后再加到我的样品中？这样做会对结果有影响吗？

爽籁清风 · 发表于 2013-11-4 16:10:19

圈门的话，是圈所有活细胞还是淋巴细胞那群？

niwanmao · 发表于 2013-11-4 18:58:14

爽籁清风发表于 2013-11-4 15:37

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谢谢倪老师，我加了lin这个抗体，可是CD31阳性率还是很高，EDTA抗凝的浓度是多啊？ ...

Lin一般是多个抗体的组合吧，你所购买的Lin抗体中包含了哪些？
至于EDTA抗凝剂的浓度，你是想自己配吗？这个似乎没有必要吧，因为现在的血常规管里面多数就是EDTA抗凝。

niwanmao · 发表于 2013-11-4 18:58:50

爽籁清风发表于 2013-11-4 15:44

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还有个问题，我可不可以把我的四种抗体混到一起然后再加到我的样品中？这样做会对结果有影响吗？ ...

可以多种抗体混合后配成cocktail再加。但是得证实过没有影响。

niwanmao · 发表于 2013-11-4 18:59:28

爽籁清风发表于 2013-11-4 16:10

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圈门的话，是圈所有活细胞还是淋巴细胞那群？

如果你不知道内皮细胞在哪个区域，那么最后还是圈所有活细胞嘛，然后再排除碎片、红细胞等区域。

爽籁清风 · 发表于 2013-12-13 20:17:42

niwanmao 发表于 2013-11-4 18:59
如果你不知道内皮细胞在哪个区域，那么最后还是圈所有活细胞嘛，然后再排除碎片、红细胞等区域。 ...

倪老师，您好，我这是检测的骨髓中内皮祖细胞和内皮细胞，您看圈哪部分细胞好啊？

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