求助流式检测细胞中线粒体超氧阴离子平均荧光强度分析

2849618420

最近在用流式检测细胞中线粒体超氧阴离子平均荧光强度，发现数据诡异不是想要的趋势，对流式图也不怎么懂，如下图，我想问问大家门内的细胞数比较少会不会影响看平均荧光强度啊，谢谢！

niwanmao

你选择的目的细胞占总数的62.6％，应该还算过的去，那么FL2的荧光强度应该还是可以反映真实结果的。
你这里只有一幅图，不知道你所说的“不是想要的趋势”是什么意思？

dragonhzqsmmu

”趋势不对“是不是M1的阳性比例很低，只有7.33%？

2849618420

niwanmao 发表于 2013-11-7 09:09

                               
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你选择的目的细胞占总数的62.6％，应该还算过的去，那么FL2的荧光强度应该还是可以反映真实结果的。
你这里 ...

每个时间点我都测正常细胞的平均荧光强度，但每次都不一样，三个时间点在15左右，另外几个时间点有30多的，也有20左右的，理论上正常细胞的MFI应该差不多的，为什么相差这么大呢?

2849618420

dragonhzqsmmu 发表于 2013-11-7 11:41

                               
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”趋势不对“是不是M1的阳性比例很低，只有7.33%？

我去检测中心测时，他们给我说我主要平均荧光强度，那个阳性率没有影响，不知道是不是这样？

niwanmao

2849618420 发表于 2013-11-7 22:09

                               
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每个时间点我都测正常细胞的平均荧光强度，但每次都不一样，三个时间点在15左右，另外几个时间点有30多的 ...

15、20、30这点差别是完全允许的误差。这不能叫相差大。就跟你看写同一个字一样，每次写肯定有差别。所以你可以把每一次的分析结果做到excel表中，然后进行统计学比较，并统计其mean±SD。

niwanmao

2849618420 发表于 2013-11-7 22:11

                               
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我去检测中心测时，他们给我说我主要平均荧光强度，那个阳性率没有影响，不知道是不是这样？ ...

从你这个平均荧光强度看，应该都是在阴性和阳性分界点附近，可能用geomean比较更靠谱

2849618420

niwanmao 发表于 2013-11-8 12:16

                               
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15、20、30这点差别是完全允许的误差。这不能叫相差大。就跟你看写同一个字一样，每次写肯定有差别。所以 ...

您说平均值统计是指不同时间点的正常组的数值来算平均值，还是同一时间点的啊，每次检测时用的阴性对照来调节测定参数，每个时间点检测都进行了调节，是不是每次都与正常组相比较，看倍数更客观呢？

2849618420

niwanmao 发表于 2013-11-8 12:17

                               
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从你这个平均荧光强度看，应该都是在阴性和阳性分界点附近，可能用geomean比较更靠谱 ...

恩，我想问问您图中的M1比列大小对于看平均强度有没有影响啊？数据是检测中心给处理的，我也下了软件来分析，M1的值应该在哪个范围比较靠谱啊？谢谢！

niwanmao

2849618420 发表于 2013-11-8 23:54

                               
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您说平均值统计是指不同时间点的正常组的数值来算平均值，还是同一时间点的啊，每次检测时用的阴性对照来 ...

统计当然是统计同一组经过同样处理的标本连续测三次的平均值，这是统计学的基本要求。
至于每次的检测，我建议不要随便调节各种参数，一定要保证每次参数的一致性，否则你的结果不可信。