新手入门，怎么用FSC/SSC圈出淋巴细胞群？

钢蛋儿

钢蛋儿

原来跟师兄做的流式比较多，但是直到师兄走了，才想起来还不会使用FCS Express
下图是先从散点图中圈出一个FSC门（猜着是活细胞），然后把FSC门拖拽出来，最后圈出一个SSC门。得到的是淋巴细胞吗？为什么觉得这群细胞特别少……希望老师们多指点

niwanmao

钢蛋儿 发表于 2013-11-24 14:42

                               
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原来跟师兄做的流式比较多，但是直到师兄走了，才想起来还不会使用FCS Express
下图是先从散点图中圈出一个 ...

可参见http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2880-1-1.html 中的图，用FSC、SSC画散点图，该帖中的蓝色细胞群就 是淋巴细胞。

钢蛋儿

niwanmao 发表于 2013-11-24 14:47

                               
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可参见http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2880-1-1.html 中的图，用FSC、SSC画散点图，该帖中的蓝色细胞 ...

回复的有点晚，谢谢倪老师了……

facetodog

FSC-W,FSC-H 干嘛。

niwanmao

facetodog 发表于 2013-11-30 17:19

                               
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FSC-W,FSC-H 干嘛。

应该是A和H吧，这两个双参数散点图主要用来排除粘连体

huoguang980789

FSC SSC散点图里，如果是全血中的淋巴细胞，对比粒细胞来讲，是体积最小，复杂度最小的那片区域

钢蛋儿

huoguang980789 发表于 2013-12-5 12:06
FSC SSC散点图里，如果是全血中的淋巴细胞，对比粒细胞来讲，是体积最小，复杂度最小的那片区域 ...

谢谢解答~

钢蛋儿

我用的流式细胞仪是Canto II  ，用的采集软件是FCSDiva (BD Biosciences)，结果显示的有FSC/SSC(W/H/A)，所以想充分利用散射的参数啊。原来的FSC门位置放错啦，应该是图中所示的下面那群吧……

ypfbluesky

钢蛋儿 发表于 2013-12-11 21:10
我用的流式细胞仪是Canto II  ，用的采集软件是FCSDiva (BD Biosciences)，结果显示的有FSC/SSC(W/H/A)，所 ...

应该用FSC-A/SSC-A或者FSC-H/SSC-H的散点图圈淋巴细胞门啊，A表示荧光脉冲的面积，H表示高度，W表示宽度。W和A或者H和A结合使用，可以去除粘连细胞