BD流式液相多重蛋白定量技术（CBA）使用手册

niwanmao

最近在逐步开始做CBA，故与大家分享这本精彩的BD官方CBA手册的中文版翻译，感谢@Mia_day 站友提供。（由于原来的文件较大，故去掉了封面和封底的图片，请@Mia_day 见谅）

简介：
Cytometric Bead Array (CBA)，即微量样本多重蛋白定量技术，是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法。

目 录
一. 前言 ............................................................................................................................................................... 1-1
二. BD CBA标准操作流程：以Th1/Th2/Th17试剂盒为例 .................2-20
1.概述 ...................................................................................................................................................... 2-5
2.使用须知 .......................................................................................................................................... 5-7
3.实验准备 .......................................................................................................................................... 7-9
4.流式细胞仪的调整 .................................................................................................................9-12
5.实验操作 .....................................................................................................................................12-15
6.数据性能 .....................................................................................................................................16-20
三. 文献应用汇总 ...............................................................................................................................21-27
四. Q & A常见问题及答案 ......................................................................................28-32

https://flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=attachment&aid=NDg2MnwwYWU0MGExMnwxNzM0OTk4ODk4fDB8

niwanmao

根据自己做下来的感受（Th1/Th2/Th17），第一次实验分为三大步：
一、标准微球的配制。
二、A1－A7微球的Mix配制。
三、仪器调整微球的配制。

为了使实验更有效，建议大家先做第二步，因为第二步的A1－A7 Mix最后要避光孵育30分钟，趁这个时间，可以做第一步的标准微球配制。然后在A1－A7 Mix与标本、标准微球混合后，由于需要孵育3小时，在这漫长的时间内，可以做第三步：仪器调整微球的配制。  这样的方式，我个人觉得是最有效的。

标准曲线建立好之后，只要机器的光路等状态没有发生大的改变，该曲线是可以一直用下来的，所以以后的检测只要直接做第二步即可，就是混合好A1－A7 Mix，然后与标本孵育3小时即可检测。

最后的分析都是通过自动化软件FCAP分析，计算很简单。

对CBA的总体感受：很方便，但较贵

dragonhzqsmmu

这么好的东西，多谢LZ共享了，CBA确实好，感觉就是贵啊，一直想开展，没舍得拉下脸和老板申请

而且BD公司自己的CBA好像种类不是很多，不知道其他几家的类似产品（eBiosceince和Biolegend）能在上面跑和分析吗？

niwanmao

dragonhzqsmmu 发表于 2013-12-3 21:16

                               
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这么好的东西，多谢LZ共享了，CBA确实好，感觉就是贵啊，一直想开展，没舍得拉下脸和老板申请

而且BD公司 ...

原理都是通的，只要原理上实现得对，都可以做。
今天流式在线讲堂中，山东一位站友就是自己用商业化抗体＋微球做血小板自身抗体，但遗憾的是没法做标准曲线，因为没有标准品。

flow

这个CBA是不错，试剂盒贵，后期的分析还要买个专用软件分析。

niwanmao

flow 发表于 2013-12-4 12:21

                               
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这个CBA是不错，试剂盒贵，后期的分析还要买个专用软件分析。

分析的软件可以向销售拷一份即可。说到这里，我这里有一份呢，我晚上把软件压缩后上传共享，会发到流式专业软件下载专帖（实名验证用户专享）

evadj86

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niwanmao

evadj86 发表于 2013-12-4 21:06

                               
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哇塞，太高档了，这是什么组合啊？几十个因子吧？

dragonhzqsmmu

evadj86 发表于 2013-12-4 21:06

                               
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NIR-A用的是远红外通道，这个是Millipore或者Bio-Rad的液相芯片产品吗？

niwanmao

evadj86 发表于 2013-12-4 21:06

                               
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@evadj86  你们单位在做这个吗？能不能给我们讲解一下这个东西的使用和解读？谢谢！