检测Th17中的IL-17

claire613

整个实验步骤中，我是同时将以下三种试剂一起加入样本：
加入 5µl 1µg/ml PMA工作液+ 4µl 50µg/ml Ionomycin 工作液（刺激剂）+ 4µl 0.5mg/ml BFA 工作液(阻断剂)

但我发现的张明霞老师的ppt中是：先加入PMA工作液+ Ionomycin，刺激1小时，再加入BFA继续培养4-5 h

这两种方式，哪种更好，更科学呢？

求指点！谢谢各位！

niwanmao

如果你做的是人的标本，建议参考张明霞老师的方法。当然，也不是说上面那种方法不科学:)

claire613

niwanmao 发表于 2013-12-27 10:22
如果你做的是人的标本，建议参考张明霞老师的方法。当然，也不是说上面那种方法不科学:) ...

谢谢倪老师！^_^

不过想问问倪老师做这个实验，是采用张明霞老师的方法吗？

niwanmao

claire613 发表于 2013-12-28 13:31:11

                               
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谢谢倪老师！^_^

不过想问问倪老师做这个实验，是采用张明霞老师的方法吗？

实在难为情，我主要做临床标本，所以没做过。我是觉得张明霞老师的结果挺好，所以方法应该不会存在问题

leosurely

经典的步骤是张老师PPT中的步骤，刺激和阻断的时间都是可以根据实验结果再来优化的。现在也有文献按照你的方法加，不能说哪种更科学，科不科学都要用实验数据说话，而且标本不一样，试剂不一样，做实验的人不一样，别人摸索好的条件不一定对你适用，所以可以参考别人的方法摸索自己的实验

爱学习的好孩子

请问哪里能找到张老师的PPT呢？谢谢

niwanmao

爱学习的好孩子 发表于 2018-8-2 14:03
请问哪里能找到张老师的PPT呢？谢谢

PPT在这里：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-1936-1-1.html
但是你涉及到的是分选，而不是分析，所以这个刺激的方法不适用你。