PE和PI

lin850424 · 发表于 2013-12-27 23:41:51

为什么BDcalibur的机器不能同时用PE和PI两种抗体，FL2用PE,FL3用PI,没问题啊,还有补偿调节有限制吗？有大于50%就不准这一说吗？

niwanmao · 发表于 2013-12-27 23:41:52

一般补偿值大于50％不太好，看看Calibrite 3 beads校准时的要求就知道了，当你的FL3和FL4之间的补偿值>50％时，软件就提示要求你手工确认，否则就无法通过。

其实就算不看上面所说的内容，我们自己想想看，当两个物体叠加的太多，你想把它们清楚的分开，这难度得有多大，正确的可能性有多小？
所以，建议放弃PE和PI共用的想法，老老实实用其它方法。
不过，据说Beckman的机器似乎可以？ @didi_zhou

lejiang · 发表于 2013-12-28 13:23:56

以前上学时做实验，用的是贝克曼的老机器，当时PI和PE是不能一起用的，PI对PE的干扰非常大，结果根本没法看。

chymanhz · 发表于 2013-12-28 14:41:48

贝克曼的FC500，ACEA NovoCyte可以做，他的2个通道分得比较开

lin850424 · 发表于 2013-12-29 10:47:36

niwanmao 发表于 2013-12-27 23:57
一般补偿值大于50％不太好，看看Calibrite 3 beads校准时的要求就知道了，当你的FL3和FL4之间的补偿值>50％ ...

恩，本来以为BDaria2能同时用PE和PI啊，看来也是不可以啊

niwanmao · 发表于 2013-12-29 15:08:45

lin850424 发表于 2013-12-29 10:47:36

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恩，本来以为BDaria2能同时用PE和PI啊，看来也是不可以啊

BD的肯定不行，别想了

EthanMr · 发表于 2013-12-30 09:49:30

lin850424 发表于 2013-12-29 10:47
恩，本来以为BDaria2能同时用PE和PI啊，看来也是不可以啊

求问楼主，你这个用的是什么软件？

niwanmao · 发表于 2013-12-30 10:20:23

EthanMr 发表于 2013-12-30 09:49
求问楼主，你这个用的是什么软件？

BD的Spectrum Viewer，挺好用的，不过补偿值供参考：http://www.bdbiosciences.com/res ... um_viewer/index.jsp

leosurely · 发表于 2013-12-30 10:54:43

niwanmao 发表于 2013-12-27 23:57
一般补偿值大于50％不太好，看看Calibrite 3 beads校准时的要求就知道了，当你的FL3和FL4之间的补偿值>50％ ...

如果要检测转染GFP质粒细胞的早期凋亡只能用PE-Annexinv +PI的试剂盒来做，Beckman的机器是可以做的

niwanmao · 发表于 2013-12-30 10:58:28

leosurely 发表于 2013-12-30 10:54
如果要检测转染GFP质粒细胞的早期凋亡只能用PE-Annexinv +PI的试剂盒来做，Beckman的机器是可以做的 ...

不过annexin V的FL3标记应该也有。

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[结构和原理] PE和PI

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