洗掉未结合抗体的必要性？

lin850424 · 发表于 2013-12-30 14:46:43

有人说抗体跟细胞结合15-30min后需要把未结合的抗体洗掉？抗体没和细胞受体结合上，也能被激发出荧光来？从而影响阳性细胞的准确度吗？还是怎么解释？
BD的annexinV-FITV和PI也需要结合完后再洗一遍吗？

niwanmao · 发表于 2013-12-30 14:46:44

洗涤很有必要，站内我记得有一个视频，关于流式基础的，可以看一下

watson77 · 发表于 2014-2-8 00:49:54

通常要洗，其实也就是稀释10倍以上。荧光抗体无论是否结合都可以被激发荧光，如果没洗可能增加阴性群的荧光强度。

AnnexinV标记荧光抗体建议洗，也可以不洗，但对照和样本处理要相同。要注意的是AnnexinV的结合依赖钙离子，因此要用AnnexinV Binding buffer洗。

lin850424 · 发表于 2014-2-8 10:25:48

watson77 发表于 2014-2-8 00:49
通常要洗，其实也就是稀释10倍以上。荧光抗体无论是否结合都可以被激发荧光，如果没洗可能增加阴性群的荧光 ...

好的，明白了

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[标本处理] 洗掉未结合抗体的必要性？