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[视频] 科研基础课堂(1)离心机的介绍和使用

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楼主
发表于 2014-1-18 17:06:18 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式

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来自JOVE免费的科研基础视频教程,本视频为实验室一般技术第1部分,关于离心机:
时间点00:00:【概述】离心机是全世界几乎每一个生物医学研究实验室都需要使用的设备。离心可分离混合物质中的不同组分。实验标本在高速旋转时,受到离心力作用,使得密度高的物质沿着离心轴向外移(即往管底方向),密度低的不动或向轴心移。最后所有组分会分层,形成我们平时看到的沉淀、上清,从而供进一步处理或分析。

时间点00:57:【离心机的组成部分和离心参数】离心机主要组成部分就是转子,可高速旋转。转子是固定的,一个离心机可以更换不同的转子。通常,离心机都会有个盖子,以防止标本飞出。有些离心机会有制冷设备可控制内部温度。离心机表面有旋钮或按钮可输入每次运行的参数,包括离心时间、温度、离心速度或离心力。离心速度用RPM(revolutions per minute)衡量,RPM是一个有点欺骗性的值,因为它并不代表使颗粒从混合物质分离的速度,而是作用于这些颗粒的力,这种力还跟转子的半径有关,所以不同的离心机使用不同大小的转子,即使其离心速度(RPM)相同,其离心力也不同。
离心力也可表示为RCF(Relative Centrifugal Force)。RCF一般用多少个地球重力加速度(g)来表示。通过视频中的算式,可以将RPM和RCF进行互相换算(r代表离心转子的半径),该算式意味着实验的成功或失败,不过其实你没必要一定要老老实实去计算,还有换算图来帮助你换算。
时间点03:29:【离心机的具体使用】开始离心标本前,需要考虑一下温度,如果你正在使用温控的离心机,就可以使离心机在离心前降到指定温度,否则就需要用其它方法冷却离心机。在离心前,还需要确保所有管盖都是转紧的。放管子的时候,注意在转子对侧的标本是配平的。如果你只要离心一根管子,那么最好再拿一根管子配平;如果要离心3根管子,也可以放成三角形配平。
离心时的配平很重要,当离心机转子到达高速时,动能非常大,如果没有配平,那么整个离心机转子就容易松动,脱离中心位置,产生严重破坏。
一旦确认转子和盖子都是安全的,就可以启动离心机,直至其到达指定速度,如果在此期间发现问题,需及时与实验室人员联系。
离心结束时,会在管底发现团块,上半部分为上清。可通过倾倒或吸管去除上清。
之后再加入液体,叫重悬。重复的离心、重悬,就叫做洗涤细胞。
现在你已经知道了离心的基本知识,接下来就可以看看一些类型的离心应用。

时间点05:48【离心机的应用】
转子固定的离心机是现在实验室中最常见的类型,很多桌面离心机都是这样。这些离心机可常用不同的转速,以方便纯化生物标本(如动物细胞),通常需要洗涤多次
与固定的转子不同的是,摆动的转子使标本离心时向外抛起,这类转子比较适合密度梯度离心,使得细胞可分布到不同的密度层,就是说比较适合分离不同种类的细胞或分离单种细胞器。
最后,超速离心机是所有离心机中最大的,它可以达到70000rpm以上,故适合分离小颗粒(如DNA、病毒等)。正是因为这种高速,所以对配平、转子和盖子的密封等要求都很高。
时间点07:23【总结】:在本篇视频中,我们了解了离心机如何工作、如何操作和启动、一些安全警告、离心机的应用。离心前,切记平衡管子。
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发表于 2015-5-18 23:01:36 | 只看该作者
JOVE的视频超赞,打好基础很重要!
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