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间日疟原虫优先感染Duffy-positive的网织红细胞,而且外周循环中往往很少有寄生虫感染的细胞,这些特点给流式利用普通的核酸染色法检测和定量带来了麻烦。Roobsoong W等人在2014年2月份的Malar J.杂志(影响因子3分多)上发表了一篇文章,介绍了一种基于抗体标记的简易方法,可快速检测间日疟感染的红细胞。
作者收集了泰国北碧府疟疾门诊诊断为间日疟的患者外周血标本,取1ml外周血洗涤、固定并以疟原虫特异性的anti-PfBiP抗体(Alexa Fluor 660)标记,以流式检测。其它用于区分间日疟阶段的标记有:晚期滋养体、裂殖初期的MSP1-Alexa Fluor 660;裂殖晚期的DBP-Alexa Fluor 555;性阶段的Pvs16。
间日疟感染的细胞比例通过流式确定(0.001%~1.00%),并通过显微镜观察Giemsa染色手工计数,对两者结果进行Spearman秩相关计算,相关系数为0.93843。
【流式分析流程图】
未感染的红细胞
未感染和感染红细胞的分析结果对比
http://www.malariajournal.com/content/pdf/1475-2875-13-55.pdf
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