转染带荧光蛋白质粒的细胞怎么测凋亡？

夜行小芯

高人们，现在实验室要对转染后的细胞测凋亡，但是转染的质粒的本身就带GFP荧光蛋白，请问这种情况如何控制由于自身带大量荧光对结果的影响？

haven_t

避开FITC通道不用即可，如果GFP过强会可能影响PE或者PI，那么这个通道也要回避，可选择7AAD vs APC

huoguang980789

BD PMG的559763

hyper

haven_t老师的方案性能上比较理想。但559763我们正在促销，您成本比较低，也可能可以用。
建议您不染，直接上GFP细胞看一下，看看FL1-FL2，FL2-FL3，FL3-FL4，可以明确的看出来GFP对各个通道的影响。
如果必须用7-AAD和AV-APC的话，建议的方案如下:
561012        BD Pharmingen™        Annexin V  APC         25 Tests        ,(100T是550474）
559925 7-AAD
556454 10X Binding Buffer。

如果实验室之前买过凋亡试剂盒，后两种试剂可能就不用买了。

夜行小芯

还有，就是如果细胞用的药也有荧光信号，并且和PI通道的一样，一测凋亡就全是PI阳性的了，怎么测？

niwanmao

夜行小芯 发表于 2014-3-25 14:33
还有，就是如果细胞用的药也有荧光信号，并且和PI通道的一样，一测凋亡就全是PI阳性的了，怎么测？ ...

就如上面@haven_t  所说，用7-AAD和annexin V APC