FRET的计算

a86856635

看到一篇做FRET的文献，里面讲到FRET的计算有个公式，有没有人知道公式中的数值是什么，是平均值乘以颗粒数吗，谢谢各位了

niwanmao

看了半天确实不太了解这个E到底哪里来的{:soso_e127:}对FRET到现在也不太懂，求助一下@didi_zhou   @gcz5340  @haven_t

a86856635

niwanmao 发表于 2014-6-17 20:45
看了半天确实不太了解这个E到底哪里来的对FRET到现在也不太懂，求助一下@didi_zhou   @gcz534 ...

谢谢老师

dragonhzqsmmu

看了一下原文里面提到“cell-associated fluorescence was assessed on a FACSCalibur
at 580 nm upon excitation at 488 nm (E1), at 670 nm after excitation
at 630 nm (E2), and at 670 nm after excitation at 488 nm (E3).
The transfer of fluorescence was calculated as FRET units as follows:
. The different fluorescence values (E)
were measured on unlabeled cells (Enone), or cells labeled with PE (EPE),
Cy5 (ECy5), or Cy5 and PE (Eboth).”，E是不是指的histogram里面阳性细胞群的平均荧光强度，E1是不是PE的基础荧光强度，E2是否cy5的基础荧光强度，而E3是否FERT后的新的荧光强度？但这种做法经典公认吗？此外从文中使用的BD Calibur的设置来看这个好像也不是基础配置，感觉像是升级过配置的机器

niwanmao

dragonhzqsmmu 发表于 2014-6-18 23:58
看了一下原文里面提到“cell-associated fluorescence was assessed on a FACSCalibur
at 580 nm upon exci ...

现在只知道FRET是一种反映量子能量迁移的东西，但更具体的就不知道了，太基础了{:soso_e127:}

dragonhzqsmmu

FRET荧光能量共振转移，之前看别人用多功能酶标仪做过，还真不知道流式细胞仪可以做这个

a86856635

dragonhzqsmmu 发表于 2014-6-19 21:45
FRET荧光能量共振转移，之前看别人用多功能酶标仪做过，还真不知道流式细胞仪可以做这个 ...

谢谢，检测细胞表面的互作应该还是流式更好一点吧