flowjo 分析 数据 super G2期接近20%

椴树

293T的单克隆细胞系长满后，直接收细胞固定染色上流式，用flowjo分析的，显示super G2期百分很高，不知道为什么会有这么高的super G2，是不是我分析的不对呢？

niwanmao

你的细胞周期做的非常漂亮{:soso_e179:}

其实原因就在于分析细胞周期前，要通过FSC和SSC排除掉细胞碎片，再通过FL2-A/FL2-W排除掉粘连体，modfit有向导式让你设这两个图形来排除碎片和粘连体，所以更方便。
你的图形中之所以出现super G2就是因为没有排除掉粘连体。

以下是modfit拟合出的结果，RCS很低，非常好。

4

5

椴树

谢谢老师，我当时用的是flowjo先FSC SSC圈门，再FL2A FL2W去除粘连体。我把我的flowjo分析的再发您看下问题在哪？

椴树

谢谢老师 我知道问题在哪里了，我确实那样划门了，除去粘连体了，但是在分析细胞周期的时候我点错了，我点到第一个门去了，因为之前是批量分析的，没注意选哪个门（现学的用flowjo分析），我刚才又重新分析了一个发现super G2没了，再跟我之前分析的比较，才发现问题所在。PS不过用flowjo分析G1达到70%，G1，S和G2大于1，super G2没了 但是subG1变成负的了，一定又是我的问题，我再检查检查。其他同学跟我说flowjo好用些，分析细胞周期的话。但是modifit好像更专业些？这两个软件分析有什么区别呢？

niwanmao

椴树 发表于 2014-6-19 23:09
谢谢老师 我知道问题在哪里了，我确实那样划门了，除去粘连体了，但是在分析细胞周期的时候我点错了，我点 ...

modfit分析细胞周期既简便，又专业，推荐细胞周期用modfit。

至于其它分析常规抗原表达率的，可以用flowjo，做出的图比较美观。