请问各位， 有没有标准的流式抗体滴定程序

zark_00

请问各位大侠，能不能推荐个标准的官方的流式抗体滴定（确定最佳工作浓度）程序，今天又要过堂了，做点准备。

按我的设计，滴定步骤为，预先设计好几个稀释梯度，对抗体和同型对照进行稀释， 把血样分成几份，每两份按（同浓度同型对照一份+同浓度抗体一份）进行孵育，经裂解和洗涤重选后上样，对比同个marker的阴性峰（同型对照样）和阳性峰（抗体染色样），间距最大，荧光强度适宜的最低浓度为最佳使用浓度。
请问我这个做法有无错误。

再有，如6色染，6色的cocktail+血样，和单色+血样的总体积发生了改变，这样的话相当于6色染中单个抗体浓度和预先摸索的抗体浓度有差别，如何破解？

谢谢各位。

niwanmao

看这里：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2484-1-1.html

再看这里：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-290-1-1.html

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zark_00

niwanmao 发表于 2014-7-24 19:04
看这里：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2484-1-1.html

再看这里：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread ...

谢谢倪老师的指点。不过current protocol 的那个方案真复杂