图解流式原理【22】：BD LSR II的光路结构

niwanmao · 发表于 2014-8-1 22:17:26

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BD LSR II的光路结构

流式细胞仪62.gif

niwanmao · 发表于 2017-12-10 22:05:13

luyexianzong 发表于 2017-12-10 12:49
倪老师，从这个光路图来看，选择PerCP-Cy5.5 （Em 695）与Alexa Fluor 647 (Em 667)，二者的发射光波长接近 ...

不冲突，平时都在搭配着用呢：）

niwanmao · 发表于 2015-2-3 08:36:11

dcl60066 发表于 2015-2-2 18:03
请问不同激光激发的光路是否是在同一光路上，不同激光所激发的荧光通道之间是否需要调补偿呢，谢谢 ...

不同激光激发当然不在一条光路上喽，但是不同激光激发的荧光有些还是需要调节补偿的。看到这里你可能就奇怪了，既然光路不同，应该不会发生荧光渗漏才对啊。确实，如果荧光素分子是如此的单纯就好了，但实际上有时候一个荧光素，它可以同时被两种波长的激光激发，例如PE，所以实际上有时候有些不同激光激发的荧光素之间还是需要调节补偿的。

参考：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-4121-1-1.html

dcl60066 · 发表于 2015-2-2 18:03:27

请问不同激光激发的光路是否是在同一光路上，不同激光所激发的荧光通道之间是否需要调补偿呢，谢谢

dcl60066 · 发表于 2015-2-3 20:06:03

谢谢解答，终于知道了

小丹3029 · 发表于 2015-6-14 16:51:58

我正有这样的疑问呢？那如果收集的通道或者滤光片不一样呢也需要补偿吗?为什么呢

niwanmao · 发表于 2015-6-14 21:40:25

小丹3029 发表于 2015-6-14 16:51
我正有这样的疑问呢？那如果收集的通道或者滤光片不一样呢也需要补偿吗?为什么呢 ...

上面回答了还是没看懂？

很简单啊，荧光分子激发后发射波长是一个范围，所以它主要波长被某一滤光片收集后，剩余一些漏光可能会被另一个滤光片收集，因此当然需要从另一个滤光片中减去这部分漏光。

小丹3029 · 发表于 2015-6-15 09:18:45

非常谢谢现在很清晰了

水念人倦 · 发表于 2015-7-7 15:37:57

多谢倪老师！

luyexianzong · 发表于 2017-12-10 12:49:19

倪老师，从这个光路图来看，选择PerCP-Cy5.5 （Em 695）与Alexa Fluor 647 (Em 667)，二者的发射光波长接近，但激发光不同，在不同光路上，应该是不冲突的？

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