IL-27两个亚基IL-27p28和EBI3的分泌情况

957615122

•HLA-DRFITC或者CD14 FITC

•CD83PercP

•IL-27p28APC

•EBI3PE
各位前辈，
最近在做IL-27的分泌情况，就是提取PBMC，然后再1ug/mlLPS刺激12小时，加brefidinA5小时后，收集细胞，染色。
请前辈们帮我看看这个实验的结果存在什么问题，谢谢！

niwanmao

957615122 发表于 2014-8-5 13:16
我看文献说DC、巨噬细胞和单核细胞等APC可以分泌IL-27，所以我想用Th17分泌IL-17的方法来看这些细胞分泌I ...

你应该如下图设门：


至于你在图片中标注的那些莫名其妙的荧光，基本上是由于细胞碎片、死细胞等引起的非特异性染色，可以将FSC/SSC散点图的门设的小一点，圈单核细胞区域。

niwanmao

是否可以先讲一下您的实验目的是什么？

957615122

niwanmao 发表于 2014-8-5 12:49
是否可以先讲一下您的实验目的是什么？

我看文献说DC、巨噬细胞和单核细胞等APC可以分泌IL-27，所以我想用Th17分泌IL-17的方法来看这些细胞分泌IL-27的水平。APC可以用HLA-DR来标记，CD83+是激活的APC的表面标记,但是做出来的结果似乎很混乱，请您帮忙看一下，非常感谢！

957615122

niwanmao 发表于 2014-8-5 21:53
你应该如下图设门：

哦，那还是设门的问题，嘿嘿，谢谢老师