Brdu和CFSE检测增殖的区别，为什么免疫细胞都是用CFSE？

椴树 · 发表于 2014-8-11 19:16:42

如题：Brdu和CFSE检测增殖的区别，为什么免疫细胞都是用CFSE？其他类型的细胞用CFSE的要少？

niwanmao · 发表于 2014-8-11 21:44:26

两种方法不一样的啊。BrdU原理上是掺入DNA，所以实质上还是属于检测凋亡或S期的细胞技术（参见：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2987-1-1.html），而CFSE则是进入细胞后，随着细胞分裂逐渐分配到子代细胞中，故属于真正的检测细胞增殖能力的技术。

dragonhzqsmmu · 发表于 2014-8-12 13:33:19

还有是否CFSE的步骤稍微简单点，同样能说明问题，所以大家都用它？

椴树 · 发表于 2014-8-12 23:03:01

niwanmao 发表于 2014-8-11 21:44
两种方法不一样的啊。BrdU原理上是掺入DNA，所以实质上还是属于检测凋亡或S期的细胞技术（参见：http://www ...

恩一个标DNA 一个标蛋白但是淋巴细胞用brdu的很少，都是用cfse，我觉得是不是有我们不知道的原因。

椴树 · 发表于 2014-8-12 23:07:29

dragonhzqsmmu 发表于 2014-8-12 13:33
还有是否CFSE的步骤稍微简单点，同样能说明问题，所以大家都用它？

恩简单的话，为什么其他细胞还在都用brdu呢

椴树 · 发表于 2014-8-13 00:47:08

niwanmao 发表于 2014-8-11 21:44
两种方法不一样的啊。BrdU原理上是掺入DNA，所以实质上还是属于检测凋亡或S期的细胞技术（参见：http://www ...

又搜索了一下，发现我这个问题有点武断了，虽然关键词 CFSE proliferation 出来的都是免疫细胞，但是关键词 brdu lymphoma cell或者CFSE cancer cell还是有些文章的。可能一个原因是大家墨守成规或者就真的是CFSE的细胞处理操作更适合免疫细胞

didi_zhou · 发表于 2014-8-13 02:49:33

BrdU一般是短时间检测，检测目的是看有多少细胞进入了S期，看增值率。由于是掺入实验，时间不能过长，超过一个细胞周期分析起来就复杂了。CFSE进入细胞以后随细胞分裂均等分裂，除了能看到多少细胞进入了增殖以外，还可以看到分裂了几次，就算时间长一点也没关系。

比如一个永生化的细胞株，一个周期在24小时左后，如果你测加药后24小时内（一个周期内）的变化用BrdU。因为这时候细胞还没有分裂成两个，CFSE不可能监测得出来，你还可以对细胞进行细分（G0，进入了S期的细胞等等）。

超过24小时，比如你要测3天的话就要用CFSE，不然你的细胞株肯定全部已经BrdU阳性了，不能反映速率了。比如都是永生化的细胞，A种一个周期是18小时，另外的B种是24小时，但是3天之后，两种细胞BrdU阳性率肯定都是100%，因为都进入过了分裂。这时候使用CFSE不仅能看到多少个细胞进入了增殖，还能看到那株分裂速度更快，进入了第几代，每一代的比例有多少。所以前提就是，细胞必须分裂了才能看到CFSE的变化。

其实还是要根据你具体的实验需求来选择。

椴树 · 发表于 2014-8-14 09:11:32

didi_zhou 发表于 2014-8-13 02:49
BrdU一般是短时间检测，检测目的是看有多少细胞进入了S期，看增值率。由于是掺入实验，时间不能过长，超过 ...

谢谢顿悟了

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