为什么荧光显微镜看到的跟流式的结果不相符

taotao8167

我用EGFP标记看转染效率，在荧光显微镜下看都是绿色的荧光，而且肉眼看洗涤过的细胞都是绿色的，主观感觉转染效率不低，可能有90%，结果用流式检测只有50%多，这是什么原因呢？

niwanmao

1、肉眼的感觉有时候会错误，可能是由于荧光的散射造成其它细胞也都是绿色。
2、流式分析时的设门非常重要，如果你没有把细胞碎片或非特异性信号排除掉，就会造成比例偏低。