前向角散射光

格利雅

各位大虾，想请教下，流式细胞仪的前向角散射光一般都用488激光照射，为什么不用其他的激光器，比如405、640等？换其他的激光器会有什么影响？
谢谢！

niwanmao

以前我也一直以为SSC只有488nm激发，后来最近看到Life的Attune流式细胞仪，才发现原来405也可以有SSC，而且他们用405的SSC结合488的SSC，可以将红细胞和有核细胞分开来，说明不用裂解红细胞也可直接分析。

chymanhz

其实各种波长都可以，但是越是短波长能量越高，同时，不同波长的散射光出来的分布也不一样。

格利雅

niwanmao 发表于 2014-8-22 21:39
以前我也一直以为SSC只有488nm激发，后来最近看到Life的Attune流式细胞仪，才发现原来405也可以有SSC，而且 ...

那意思是不同的激光可以检测到不同的细胞大小和颗粒度的细胞？比如传统488nm最小能检测到0.5um，那么405nm可能就能检测到更小的颗粒？

niwanmao

格利雅 发表于 2014-8-24 20:25
那意思是不同的激光可以检测到不同的细胞大小和颗粒度的细胞？比如传统488nm最小能检测到0.5um，那么405n ...

呃，具体能检测到多少大小，我就不清楚了。  @chymanhz 是否了解

chymanhz

niwanmao 发表于 2014-8-24 22:06
呃，具体能检测到多少大小，我就不清楚了。  @chymanhz 是否了解

这和波长关系不大，主要在检测电路上的噪声有关，尽可能的收集到FSC信号同时降低噪声就可以检测到更小体积。目前流式细胞仪最小好像到0.1um，主流在0.5um左右。理论上，颗粒越小，前向散射光占整个散射光的百分比就少了。颗粒大的时候，前向散射光占比例就越大。所以对于小颗粒，增加FSC收光角度可以接收到更多信号，而对于大颗粒，增大角度对于增加信号大小不明显

格利雅

chymanhz 发表于 2014-8-25 13:07
这和波长关系不大，主要在检测电路上的噪声有关，尽可能的收集到FSC信号同时降低噪声就可以检测到更小体 ...

非常感谢！！