PBMC细胞的加刺激素培养后洗涤除去刺激素能否再培养

sqt

外周血PBMC提取后，胞内染色需要加刺激素。但是试了好几遍，加入刺激素培养的时间只能是5-6个小时，流式只能白天做所以每次都得半夜爬起来加刺激素早上过来染色。所以想请教战友们能不能提完PBMC后加入刺激素培养5-6小时，然后更换新鲜的培养基培养过夜染色第二天再染色？

niwanmao

你早上7点钟过来加刺激剂，不是中午就能染色了？

sqt

染也需要3-4个小时，下午做流式的老师都下班了，来不及检测。刺激素的时间又不能加太长

niwanmao

sqt 发表于 2014-9-22 19:52
染也需要3-4个小时，下午做流式的老师都下班了，来不及检测。刺激素的时间又不能加太长 ...

换破膜剂嘛，用beckman的perfix-nc做胞内染色，前后只有45分钟即可。如果不想换，那就再提早，做实验的时候加班加点很正常，做研究又想做好又想睡好觉，还真没有这么好的事情。