求助关于细胞内抗原做流式的问题，各位做过的大神请进...

潜才lxl

细胞内抗原做流式的步骤是什么，做出来的结果稳定吗？为什么我测的两次结果数据相差近2倍呢

niwanmao

胞内抗原染色步骤可根据你选择的破膜剂而定，破膜剂会有配套的说明书，根据说明书一般都能做好。至于两次做的结果会有差异，但不会差异很大。至于你所说的相差近两倍，我不知道你这个抗原的表达率是否很低，如果很低，有时候多一个细胞就会影响比例。

潜才lxl

niwanmao 发表于 2014-11-3 20:03
胞内抗原染色步骤可根据你选择的破膜剂而定，破膜剂会有配套的说明书，根据说明书一般都能做好。至于两次做 ...

我是按说明书来做的呢，这个抗原表达量也不低

niwanmao

潜才lxl 发表于 2014-11-4 22:28
我是按说明书来做的呢，这个抗原表达量也不低

你把原始数据或者有比例的图传上来看看，需要看看你这个抗原的分布。

潜才lxl

niwanmao 发表于 2014-11-4 22:31
你把原始数据或者有比例的图传上来看看，需要看看你这个抗原的分布。

数据还没拷回来，等拷回来才能发

月下听蝉

niwanmao 发表于 2014-11-4 22:31
你把原始数据或者有比例的图传上来看看，需要看看你这个抗原的分布。

倪老师，有没有针对胞内抗原的染料，又不影响细胞后续生存的？

niwanmao

月下听蝉 发表于 2014-11-11 15:16
倪老师，有没有针对胞内抗原的染料，又不影响细胞后续生存的？

GFP或EGFP

jmc_1211

niwanmao 发表于 2014-11-11 19:42
GFP或EGFP

用GFP或EGFP不影响细胞的后续培养，为什么呢？胞内抗原染色都需要固定通透，这样细胞不就没法再培养了吗？
请倪老师指点，谢谢！

niwanmao

jmc_1211 发表于 2018-1-9 10:09
用GFP或EGFP不影响细胞的后续培养，为什么呢？胞内抗原染色都需要固定通透，这样细胞不就没法再培养了吗 ...

我的意思你将表达那个胞内抗原的那段基因转染上GFP表达序列，然后使那个抗原能够带上GFP蛋白，不就可以边培养边检测荧光了：）