流式测凋亡的相关技术问题

王娟

大家好，在下最近做流式出现了一个很奇怪的现象，在用贝克曼的流式做凋亡的时候，发现阴性细胞分两群，用的是Hoechst-PI双染检测细胞的凋亡，在上机检测的时候，出现了如下的情况，试了不同的细胞，问题依然存在。烦请各位有经验的人帮我分析分析，是哪里的问题？而且是只有6通道检测到了两群，PI通道却只有一群，貌似也不是补偿的问题，这两个染料之间没有干扰啊？实在是想不通啊？{:soso_e132:}

王娟

怎么没有人回答呢？难道大家都没见过这样的情况吗？马上就要做下一次实验了，急求啊！@niwanmao ，倪老师，不知您有没有见过这种情况？

niwanmao

王娟 发表于 2014-11-24 09:07
怎么没有人回答呢？难道大家都没见过这样的情况吗？马上就要做下一次实验了，急求啊！@niwanmao ，倪老师， ...

没想到beckman的机器紫外在FL6，有点不适应：）

对于这种分两群的情况，你可以将两群分别圈出来，然后在FSC/SSC散点图上看位置，有可能是一些细胞碎片的影响。