NK 细胞流式检测封闭问题

yurain2002

我进行人外周血NK细胞检测。NK细胞高表达Fc段，抗体孵育前必须先进性封闭，对吗？应该选用什么样的封闭试剂进行封闭呢？请帮忙推荐，谢谢！

niwanmao

可以采用商业化的Fc阻断剂，也可以使用正常人的血清。

yurain2002

niwanmao 发表于 2014-12-6 19:40
可以采用商业化的Fc阻断剂，也可以使用正常人的血清。

谢谢倪老师！如果选择商业化的Fc阻断剂，倪老师有没有可以推荐的产品？非常感谢！

niwanmao

yurain2002 发表于 2014-12-12 00:59
谢谢倪老师！如果选择商业化的Fc阻断剂，倪老师有没有可以推荐的产品？非常感谢！ ...

这个Fc阻断的东西，我觉得各个公司都有而且都差不多，没有什么可以推荐的，你搜索引擎搜一下“fc blocking”即可。

yurain2002

niwanmao 发表于 2014-12-12 08:23
这个Fc阻断的东西，我觉得各个公司都有而且都差不多，没有什么可以推荐的，你搜索引擎搜一下“fc blockin ...

谢谢倪老师！

令狐武玲

倪老师，我做的是单核细胞表面分子鉴定，是否也需要在做流式之前封闭？

niwanmao

令狐武玲 发表于 2014-12-18 17:44
倪老师，我做的是单核细胞表面分子鉴定，是否也需要在做流式之前封闭？

如果不是做CD16，可以不封闭。

令狐武玲

niwanmao 发表于 2014-12-18 19:53
如果不是做CD16，可以不封闭。

好的，谢谢倪老师。然后下一步我是要诱导分化为树突状细胞，分析表型CD1a和CD83，CD80、CD86、HLA-II，（后三者未进行），请问是否也不需要封闭？另外，这五个表型2个FITC标记，3个PE标记，可以同时加入五个抗体测吗？谢谢

niwanmao

令狐武玲 发表于 2014-12-18 21:14
好的，谢谢倪老师。然后下一步我是要诱导分化为树突状细胞，分析表型CD1a和CD83，CD80、CD86、HLA-II，（ ...

一般情况下不需要封闭。
由于荧光标记重复，当然不能同时加入。如果要同时加，你需要把这五个抗体搭配五种不同通道的荧光。

令狐武玲

niwanmao 发表于 2014-12-18 21:18
一般情况下不需要封闭。
由于荧光标记重复，当然不能同时加入。如果要同时加，你需要把这五个抗体搭配五 ...

明白了，感谢倪老师