血小板的凋亡

tco_001 · 发表于 2015-1-16 21:15:58

各位老师，小弟最近在检测一批样本血小板的凋亡的情况，用的是ANNEXIN V-PI法。将全血制备PRP后加试剂上机，结果如下。按照这个结果，活血小板比例特别低，在取样的时候，已经很注意防止血小板的活化了，那么这个结果是我的门设的有问题还是结果就是这样的？看了一下文献，也没有看到一个类似的研究可以参考一下，还请各位老师解答一下。

niwanmao · 发表于 2015-1-19 19:27:02

晕，这个问题又是前段时间没有注意到的。不好意思。

不知道你有没有加血小板相关标记来圈血小板？而且你这里设门的依据是什么？

tco_001 · 发表于 2015-1-19 20:39:41

niwanmao 发表于 2015-1-19 19:27
晕，这个问题又是前段时间没有注意到的。不好意思。

不知道你有没有加血小板相关标记来圈血小板？而且你这 ...

我用的是PRP来做的，PRP跑过一个流式，用CD41标记基本都是阳性
图中的门是用两个单阳来设的
这个图的血小板也是cd41标记过的，老师说可能是CD41有荧光泄露到其他通道了，我准备过两天有标本了再做一下看看是不是还是这样

niwanmao · 发表于 2015-1-19 20:46:22

tco_001 发表于 2015-1-19 20:39
我用的是PRP来做的，PRP跑过一个流式，用CD41标记基本都是阳性
图中的门是用两个单阳来设的
这个图的血小 ...

不太象荧光渗漏。下次做好把FCS文件传上来看看

tco_001 · 发表于 2015-1-21 15:43:02

又做了一下今天，把结果给倪老师看一下
FS/SS选血小板，不染的一管设门，根据PI/ANNEXIN V单染的挑战，然后再应用到其他管首先是空白管fs/ss

1

选择血小板以后设门

2

然后根据两个单染的调整一下

确定好门后应用与样本，我上传一个样本的结果给您

tco_001 · 发表于 2015-1-21 15:44:21

niwanmao 发表于 2015-1-19 20:46
不太象荧光渗漏。下次做好把FCS文件传上来看看

这次没有染血小板表明标志物，从结果看，早期凋亡的比例还是比较高的，我打算再把血小板的膜电位测一下用JC-1法

niwanmao · 发表于 2015-1-21 20:54:30

tco_001 发表于 2015-1-21 15:44
这次没有染血小板表明标志物，从结果看，早期凋亡的比例还是比较高的，我打算再把血小板的膜电位测一下用 ...

血小板有线粒体吗？

niwanmao · 发表于 2015-1-21 20:55:08

tco_001 发表于 2015-1-21 15:43
又做了一下今天，把结果给倪老师看一下
FS/SS选血小板，不染的一管设门，根据PI/ANNEXIN V单染的挑战，然后 ...

这几个图形好像还可以吧。

tco_001 · 发表于 2015-1-21 21:03:38

niwanmao 发表于 2015-1-21 20:54
血小板有线粒体吗？

有的，我测了以后把图发给您看一下

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[凋亡检测] 血小板的凋亡