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[其它] 抗体滴定

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发表于 2015-7-18 17:12:07 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星已解决
关于抗体滴定我想请问最后是计算信噪比判断吗?是用"阳性群标记信号的geomean/阴性群标记信号的geomean"吗?例如单标APC的滴定是用阳性群APC信号的geomean/阴性群APC信号的geomean"吗?

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首先在直方图上圈出阳性群和阴性群,然后添加statistics,读出阳性群和阴性群的geomean,并且读出阴性群的SD,最后按照前述公式计算。 如下图根据公式计算出SI为5.08
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发表于 2015-7-18 17:12:08 | 显示全部楼层
爱白衣杀手 发表于 2015-7-19 10:16
请问在flowjo上怎么计算这个数值呢?

首先在直方图上圈出阳性群和阴性群,然后添加statistics,读出阳性群和阴性群的geomean,并且读出阴性群的SD,最后按照前述公式计算。
如下图根据公式计算出SI为5.08
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发表于 2015-7-18 20:14:46 | 显示全部楼层
(阳性群标记信号的geomean-阴性群标记信号的geomean)/2*阴性群的SD
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 楼主| 发表于 2015-7-19 10:16:19 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-7-18 20:14
(阳性群标记信号的geomean-阴性群标记信号的geomean)/阴性群的SD

请问在flowjo上怎么计算这个数值呢?
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 楼主| 发表于 2015-8-15 15:39:18 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-7-18 17:12
首先在直方图上圈出阳性群和阴性群,然后添加statistics,读出阳性群和阴性群的geomean,并且读出阴性群 ...

倪老师您好,如果直方图上信号明显不呈正态分布还用geomean计算信噪比吗吗?还是用median?
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发表于 2015-8-16 20:57:07 | 显示全部楼层
爱白衣杀手 发表于 2015-8-15 15:39
倪老师您好,如果直方图上信号明显不呈正态分布还用geomean计算信噪比吗吗?还是用median? ...

明显不呈正态分布的,一般就说明可能是由于细胞死亡或非特异性染色过强造成的,正常情况下选择表达良好的细胞,并且保证细胞活力,用这种细胞来计算信噪比才是对的。
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 楼主| 发表于 2015-8-16 21:16:02 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-8-16 20:57
明显不呈正态分布的,一般就说明可能是由于细胞死亡或非特异性染色过强造成的,正常情况下选择表达良好的 ...

谢谢倪老师,我又遇到个问题,我标的抗原有阴性,低表达,高表达三种同时存在又如何滴定呢?怎么计算?三者能分开最好。
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发表于 2015-8-16 21:41:09 | 显示全部楼层
爱白衣杀手 发表于 2015-8-16 21:16
谢谢倪老师,我又遇到个问题,我标的抗原有阴性,低表达,高表达三种同时存在又如何滴定呢?怎么计算?三 ...

是这样的,如果要滴定抗体,就得找能够高表达该抗原的细胞进行滴定,滴定抗体,针对的是抗体,而不是细胞,所以细胞种类是可以换的。
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发表于 2017-4-12 19:59:21 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-8-16 21:41
是这样的,如果要滴定抗体,就得找能够高表达该抗原的细胞进行滴定,滴定抗体,针对的是抗体,而不是细胞 ...

抗体滴定直接看图分群好不好不行么,为啥还要计算?
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发表于 2017-4-12 20:11:56 | 显示全部楼层
wksnzh 发表于 2017-4-12 19:59
抗体滴定直接看图分群好不好不行么,为啥还要计算?

计算出来比较客观。肉眼能看出显著差异当然也可以喽。
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