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〖你问我答〗这是真的阳性信号吗?

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发表于 2016-12-26 20:10:34 | 显示全部楼层 |阅读模式

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真真,假假,如何识别它?

问题
我做了样本,检测的是淋巴细胞中TCR VB7 PE,然而,却看到一群CD3-的细胞TCR VB7表达特别高,是不是应该算阳性?
FcR.jpg



回答
白细胞(除了T细胞)表面大多表达CD16、CD32、CD64等Fc受体,这些受体可与各种抗体的Fc端结合,所以会出现非特异性荧光。其中以单核细胞、巨噬细胞尤甚。

如果不对这些细胞的Fc受体进行阻滞,你的实验结果就可能会出现假阳性或者奇怪的结果,例如上图就是典型的例子,TCR受体是T细胞特异性表达的,出现在CD3阴性群体中,那就与现实不符了。

使用Fc阻断因Fc受体造成的非特异性结合,就能够完全取代同型对照,反映出真实的表达水平。

对上面的标本进行Fc Block之后,发现结果就正常了(如下图)
FcR 2.jpg


--EOF--
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