间接染色与自制荧光结合抗体的比较

lionmilk

有时候想标记的抗原没有对应已荧光素结合抗体卖，一般可以使用间接染色法，先用无荧光素的一抗，再加荧光素标记的二抗。最近发现，也有试剂盒（比如abcam的）可以自己把Unconjugated一抗制备成想要的荧光素标记抗体。
这两种方案对比，那种方案更可靠些呢？

望各位赐教，谢谢！

niwanmao

各有优势。
间接标记：存在一定放大信号作用，但由于处理步骤增多，容易丢失细胞或导致更多非特异性染色，变数偏大。
自己制备荧光标记抗体：可与其它荧光素抗体一起标记，但是自己制备首先在质量上如何（荧光素和抗体比例很关键），其次是性价比上如何，都需要考虑。

lionmilk

谢谢倪老师，之前做间接标记，确实感觉非特异性染色会比较明显，而且滴定的话，似乎挺麻烦的，不知道可否分享一下这方面的经验