流式分选阳性细胞，离心后却发现无细胞沉淀

nkuguian

流式分选了阳性细胞，大约6万-8万个细胞，200g 5min 离心后却无细胞沉淀。分选前的细胞悬液中有很多细胞。请问大咖这是什么原因？

niwanmao

离心速度太低，导致细胞没有离心下去。
大多用500g

nkuguian

niwanmao 发表于 2017-6-26 19:41
离心速度太低，导致细胞没有离心下去。
大多用500g

分选后观察收集管中是有细胞的，但500g高速离心后还是没看到沉淀。有点崩溃

niwanmao

nkuguian 发表于 2017-9-12 11:43
分选后观察收集管中是有细胞的，但500g高速离心后还是没看到沉淀。有点崩溃 ...

应该不至于，你分选前的6～8万个细胞是电脑上显示的分选数量结果还是你对分选后标本进行绝对计数算出来的？

ghqiu09

一般就是加大转速，实在看不见就死马当活马医，弃上清的时候直接用倒，一般损失会少一点

slqian

你说的6万到8万细胞是不是计算机上显示的？如果是，你用的是不是在流动池激发的流式分选机器？如果是，估计你细胞破碎了。如果不是，你看看是不是收集液的粘度或者密度很高。

我想成大牛

nkuguian 发表于 2017-9-12 11:43
分选后观察收集管中是有细胞的，但500g高速离心后还是没看到沉淀。有点崩溃 ...

港真，6-8万个细胞能形成肉眼可见的细胞团吗？你就当它都沉淀在管低直接做就好了。离心用500-700g。

miliamlau

这么少细胞还用这么低转速，离不下来是肯定的。就算是转速高，体积大了也离不下来。你这种细胞量我们一般用1.5ml EP管接收，分选后4度下500g 离心5min。

miliamlau

slqian 发表于 2017-9-14 15:34
你说的6万到8万细胞是不是计算机上显示的？如果是，你用的是不是在流动池激发的流式分选机器？如果是，估计 ...

我发现有些同志把Aria说得跟匀浆器一样。
我就纳闷了，我们单位三个附属医院的研究生，放着自己医院300块一小时的Moflo不用，非跑我这来用600块一小时的Aria，图的啥呢？

niwanmao

miliamlau 发表于 2017-12-5 01:59
我发现有些同志把Aria说得跟匀浆器一样。
我就纳闷了，我们单位三个附属医院的研究生，放着自己医院300块 ...

没错。其实各种机器都有各自的优缺点，我没用过分选仪，但用过多个品牌的分析型仪器，很多效果还是跟标本处理、技术等有关的。机器毕竟都是人操纵的，人才是主体。