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楼主: 18832287133

[淋巴细胞相关] APC标记的IL-10位置出现不对

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发表于 2018-7-29 13:05:14 | 显示全部楼层
18832287133 发表于 2018-7-28 08:46
老师,我们分析的是NKT10,前面先把NKT圈出来,然后再设门,目前还没见文献报道有T-bet+IL-10+的NKT细 ...

其它图我都没看到,不知道你前面的设门如何。无论评价。
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 楼主| 发表于 2018-7-29 15:49:04 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-7-29 13:05
其它图我都没看到,不知道你前面的设门如何。无论评价。

老师,我是这样做的,见下面流式图

圈出淋巴细胞

圈出淋巴细胞

gate P1,圈出iNKT细胞

gate P1,圈出iNKT细胞
图片3.png
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发表于 2018-7-29 16:40:33 | 显示全部楼层
18832287133 发表于 2018-7-29 15:49
老师,我是这样做的,见下面流式图

这几个图放出来就明显看出是死细胞的非特异性染色。不是特异性的。所以你之前认为特异性的判断是错误的。
你可以通过加入死活染料,排除掉死细胞之后,就可以测出真正阳性的结果。
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 楼主| 发表于 2018-7-29 19:21:21 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-7-29 16:40
这几个图放出来就明显看出是死细胞的非特异性染色。不是特异性的。所以你之前认为特异性的判断是错误的。 ...

好的,谢谢老师
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
 楼主| 发表于 2018-7-29 19:38:38 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-7-29 16:40
这几个图放出来就明显看出是死细胞的非特异性染色。不是特异性的。所以你之前认为特异性的判断是错误的。 ...

倪老师,我还想问一个问题,细胞透化固定以后不是都已经死了吗,还需要区分死活吗?
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发表于 2018-7-29 20:35:38 | 显示全部楼层
18832287133 发表于 2018-7-29 19:38
倪老师,我还想问一个问题,细胞透化固定以后不是都已经死了吗,还需要区分死活吗? ...

有针对需固定破膜的商品化死活染料。在破膜前染。
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 楼主| 发表于 2018-7-30 08:30:04 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-7-29 20:35
有针对需固定破膜的商品化死活染料。在破膜前染。

倪老师,这个死活染料也是要占用一个通道的吧,但目前我们的C6四通道已被检测指标给占用完了,有没有其他的办法可以减少这种非特异性染色呀。
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发表于 2018-7-30 21:31:15 | 显示全部楼层
18832287133 发表于 2018-7-30 08:30
倪老师,这个死活染料也是要占用一个通道的吧,但目前我们的C6四通道已被检测指标给占用完了,有没有 ...

只能用不规则门,圈R1门内避开对角线信号的阳性部分
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 楼主| 发表于 2018-7-31 08:45:43 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-7-30 21:31
只能用不规则门,圈R1门内避开对角线信号的阳性部分

谢谢老师,真是受益匪浅
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