人类调节性T细胞表面抗原CD278的检测

ghost2r · 发表于 2010-12-8 22:58:22

我准备分离组织单个核细胞检测调节性T细胞表面抗原CD278的表达情况。

现已订购eBioscience公司的荧光标记抗体，如下：

大家看看我的荧光有冲突吗？会不会存在种属相互反应之类的问题？

另外，同型对照抗体要如何选择？？？？

niwanmao · 发表于 2010-12-8 22:58:23

我准备分离组织单个核细胞检测调节性T细胞表面抗原CD278的表达情况。

现已订购eBioscience公司的荧光标记 ...
ghost2r 发表于 2010-12-8 22:58

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荧光没有冲突，但标记的选择上我有点建议：
由于CD278表达量肯定不会很高，所以我建议把表达量高的CD4改为FITC，而CD278改为荧光较强的PE-cy5或PE-cy5.5等。

ghost2r · 发表于 2010-12-9 09:07:04

恩，一开始我们也是这样设计标记的。但是公司CD278没有标记PE-cy5的。。。

ghost2r · 发表于 2010-12-9 09:09:56

那么，倪老师，我的同型对照目前只订了Mouse IgG1 K Isotype Control FITC，我们学校做流式的老师说不用做对照。那我最佳的方案的话是不是还应该再定一些同型对照的抗体？

niwanmao · 发表于 2010-12-9 10:46:09

那么，倪老师，我的同型对照目前只订了Mouse IgG1 K Isotype Control FITC，我们学校做流式的老师说不用做 ...
ghost2r 发表于 2010-12-9 09:09

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因为你要检测CD278的表达，还是需要这个同型对照的，除非你的CD278阳性细胞跟阴性细胞分的很开。其它CD4、CD25等不用同型也没关系。

ghost2r · 发表于 2010-12-9 12:12:56

谢谢倪老师{:3_59:}

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