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[结构和原理] 流式细胞总数测定

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发表于 2019-5-13 14:17:12 | 显示全部楼层 |阅读模式
30流星
流式小白咨询一下,目前已经了解流式测各种标记的细胞在总共细胞里面的比例,然后知道某某阳性占多少。

但是,有些文章直接就说某细胞数量是多少,另外一个细胞数量又是多少,请问那是怎么测的?
比如说,从血里面取的细胞,可能是1ml里面含有多少个ABC细胞,但是如果你是从组织液或者器官里面取出来的单个核细胞,你怎么来给出结论,某个细胞数量是 10的多少次方?因为取材你也不可能完全取干净。一直不明白细胞总量的值是怎么个测法和表示,望请解答。谢谢诶

发表于 2019-5-13 15:11:46 | 显示全部楼层
你说的是绝对数吧。
要测细胞绝对数,需要用已知浓度的绝对计数微球加进去,通过公式计算。
例如微球浓度1000个/ul,那么加入10ul微球,你就知道加入了1万个微球。此时的样本体积是100ul,那么微球在样本中的浓度就是100/ul,通过这个已知的浓度,我们通过细胞与微球之间的比例,就可以计算出细胞的浓度,最后乘以原样本的体积,就是细胞总数量。
 楼主| 发表于 2019-5-15 01:37:12 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-5-13 15:11
你说的是绝对数吧。
要测细胞绝对数,需要用已知浓度的绝对计数微球加进去,通过公式计算。
例如微球浓度10 ...

理解力,谢谢老师
 楼主| 发表于 2019-5-15 01:45:46 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-5-13 15:11
你说的是绝对数吧。
要测细胞绝对数,需要用已知浓度的绝对计数微球加进去,通过公式计算。
例如微球浓度10 ...

感谢老师回复。

那再问一下,需要考虑进去一些操作过程中的丢失的细胞吗?

脾脏,淋巴结,胸腺等直接研磨然后标记处理测结果,这个取的就是一整个的,给出绝对数也说的明白。

但是,
比如血里面的绝对数,只能取一部分的血进行测量,不同动物的血量不一样,那就只能估算吗?
谢谢

发表于 2019-5-15 15:13:00 | 显示全部楼层
qiany0121 发表于 2019-5-15 01:45
感谢老师回复。

那再问一下,需要考虑进去一些操作过程中的丢失的细胞吗?

组织样本不建议,你无法通过这样估算绝对数,只能通过称量体积和重量。
至于血,我前面说的绝对数,指的是浓度,例如1000个细胞/ul
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