查看: 202|回复: 1
收起左侧

[细胞增殖] 细胞增殖实验刺激几天后细胞死了很多怎么办?

[复制链接]
发表于 2019-8-13 16:18:18 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
各位老师:
      我前两天第二次做CFSE细胞增殖实验,用1uM的CFSE染色细胞,37度孵育10min,然后用RPMI1640+10%FBS洗涤细胞三次后铺板,24孔板每孔每孔一百万个细胞,用PMA和肽段刺激5天,到第四天的时候显微镜下看,染色的细胞感觉都变少了,部分飘起来,像都已经死了的样子。而没有染色的细胞用PMA刺激细胞明显增多了很多。各位老师帮忙分析一下,我应该怎么优化才能把这个实验做好,需要降低CFSE浓度或者染色缓冲液中添加蛋白或者需要在细胞中加入IL-2吗?谢谢各位老师。以下是我的流式图。

微信图片_20190813161542.png
微信图片_20190813161701.png
发表于 2019-8-13 22:28:58 | 显示全部楼层
CFSE做的梯度,然后孵育时间也做的梯度。但首先要保证细胞状态良好。
您需要登录后才可以回帖 登录 | 加入流式中文网

本版积分规则

关闭

本站推荐上一条 /1 下一条

手机版|流式中文网    

GMT+8, 2019-12-15 08:07

Powered by Discuz! X3.2

© 2001-2013 Comsenz Inc.