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[功能检测] CD8 T 胞内染色方法

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发表于 2019-10-9 10:01:20 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
想染CD8 T内的颗粒酶、穿孔素、IFNγ、ki-67、以及表面的CD107a,没有找到合适的protocol。请问各位老师,需要加PIB吗,CD107a什么时候加呢?

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PIB是啥? CD107a的染色参见:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4931065/ 其它标记都是需要破膜的。
发表于 2019-10-9 10:01:21 | 显示全部楼层
PIB是啥?
CD107a的染色参见:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4931065/

其它标记都是需要破膜的。
 楼主| 发表于 2019-10-10 08:12:03 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-10-9 22:54
PIB是啥?
CD107a的染色参见:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4931065/

谢谢倪老师,PMA,ionomycin,Brefeldin A,偷懒了,就写成了 PIB,染胞内的这些marker需要加这些吗,还有就是记得之前看过您一篇帖子,关于对照的,里面提到了 生物学对照 FMO 和Isotype。生物学对照是指没加PIB的细胞吗?
发表于 7 天前 | 显示全部楼层
xusmilemen 发表于 2019-10-10 08:12
谢谢倪老师,PMA,ionomycin,Brefeldin A,偷懒了,就写成了 PIB,染胞内的这些marker需要加这些吗,还 ...

是的
 楼主| 发表于 7 天前 | 显示全部楼层

谢谢倪老师!我这几天一直被一个问题困扰,就是到底加不加PMA和离子霉素的问题,问了很多师兄师姐,大多数的回答就是染胞内的试验现在都这么做。
但是我还是不太明白加和不加的区别,加了之后还能反映出疾病本身的状态吗?如果不加,又担心信号太弱,如果不加可不可以只用BFA和莫能菌素孵育4-6小时,这样是不是更直接反应疾病中的特点?如果加了PMA和离子霉素是不是反应的是这些细胞体外的功能?
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